引論：我們?yōu)槟砹?3篇醫(yī)學(xué)進(jìn)展范文，供您借鑒以豐富您的創(chuàng)作。它們是您寫作時(shí)的寶貴資源，期望它們能夠激發(fā)您的創(chuàng)作靈感，讓您的文章更具深度。

篇1

主辦單位：西北農(nóng)林科技大學(xué)

出版周期：月刊

出版地址：陜西省楊陵市

語(yǔ)

種：中文

開(kāi)

本：大16開(kāi)

國(guó)際刊號(hào)：1007-5038

國(guó)內(nèi)刊號(hào)：61-1306/S

郵發(fā)代號(hào)：52-60

發(fā)行范圍：

創(chuàng)刊時(shí)間：1980

期刊收錄：

核心期刊：

中文核心期刊(2008)

中文核心期刊(1992)

期刊榮譽(yù)：

Caj-cd規(guī)范獲獎(jiǎng)期刊

聯(lián)系方式

篇2

主辦單位：黑龍江省紅十字醫(yī)院;黑龍江省森工總醫(yī)院

出版周期：半月

出版地址：黑龍江省哈爾濱市

語(yǔ)

種：中文

開(kāi)

本：16開(kāi)

國(guó)際刊號(hào)：1673-6273

國(guó)內(nèi)刊號(hào)：23-1544/R

郵發(fā)代號(hào)：14-12

發(fā)行范圍：國(guó)內(nèi)外統(tǒng)一發(fā)行

創(chuàng)刊時(shí)間：2001

期刊收錄：

Pж(AJ) 文摘雜志(俄)(2009)

核心期刊：

期刊榮譽(yù)：

聯(lián)系方式

篇3

迄今為止從不同生物體內(nèi)誘導(dǎo)的抗菌肽已不下200種,僅從昆蟲(chóng)體內(nèi)分離獲得的就多達(dá)170余種。根據(jù)抗菌肽的結(jié)構(gòu),可將其分為5類:(1)單鏈無(wú)半胱氨酸(Cys)的抗菌肽,或由無(wú)規(guī)則卷曲連接的兩段а-螺旋組成的肽。該類包括天蠶素Cecropins,Magainins等。Magainins最初是從非洲爪蟾的皮膚中發(fā)現(xiàn)的,它是爪蟾的皮膚在一定的環(huán)境壓力下分泌出的抗感染和促進(jìn)傷口愈合的成分,由兩個(gè)緊密相連的肽鏈組成,每一個(gè)肽鏈有23個(gè)氨基酸,低濃度便可抑制許多細(xì)菌和真菌生長(zhǎng)[7]。(2)富含某些氨基酸殘基但不含Cys的抗菌肽。如富含脯氨酸(Pro)或甘氨酸(Gly)殘基的抗菌肽。如從豬腸內(nèi)分離的抗菌肽PR39中Pro含量占49%[6]。鞘翅肽Coleoptericin和半翅肽Hemiptericin的全序中富含Gly[8]。(3)含一個(gè)二硫鍵的抗菌肽,該二硫鍵的位置通常在肽鏈C端。如爪蟾皮膚細(xì)胞中產(chǎn)生的Brevinins[9]。(4)有兩個(gè)或兩個(gè)以上二硫鍵,具有β折疊結(jié)構(gòu)的抗菌肽。如綠蠅防御素(Phormindefensin),分子內(nèi)有6個(gè)Cys形成3個(gè)分子內(nèi)二硫鍵,肽鏈C末段是帶有擬β轉(zhuǎn)角的反向平行的β片層[10]。實(shí)驗(yàn)證明,分子中的二硫鍵在其抗菌作用中至關(guān)重要。(5)由其他已知功能較大的多肽衍生而來(lái)的具有抗菌活力的肽。

2.抗菌肽的作用及機(jī)理

2.1抗菌肽的抗菌作用及其機(jī)理抗菌肽分子可以在細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)膜上穿孔而形成離子孔道,造成細(xì)菌細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)破壞,引起胞內(nèi)水溶性物質(zhì)大量滲出,而最終導(dǎo)致細(xì)菌死亡?？咕姆肿邮紫冉Y(jié)合在質(zhì)膜上,接著其分子中的疏水段和兩親性α-螺旋也插入到質(zhì)膜中,最終通過(guò)膜內(nèi)分子間的相互位移,抗菌肽分子聚集形成離子性通道,使細(xì)菌失去了膜勢(shì)而死亡[10-14]。但是,Gazit[15]等得出的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,抗菌肽只是結(jié)合到了單位膜的表面上,并未插入膜中,更未形成通道。然而,抗菌肽的作用靶部位是細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)膜,以及抗菌肽的作用結(jié)果是導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)膜通透性增大等基本內(nèi)容是確切無(wú)疑的,這也正是抗菌肽與青霉素等傳統(tǒng)抗生素對(duì)細(xì)菌作用機(jī)制不同的本質(zhì)所在。

2.2抗菌肽的抗病毒作用及其機(jī)理研究發(fā)現(xiàn)煙芽夜蛾幼蝦的血淋巴對(duì)6種DNA、RNA病毒有明顯的抑制作用,使病毒感染力迅速降低,而且這種抗病毒活性具有廣譜性。Mariam[16]試驗(yàn)表明來(lái)源于爪蟾的抗菌肽Magainins及其它Magainins類抗菌肽具有抗皰疹病毒-HSV的作用,還發(fā)現(xiàn)人的嗜中性粒細(xì)胞防御素(HNP-1)對(duì)一種皰疹病毒有抑制作用。此外,蜂毒素和天蠶素也可以在亞毒性濃度下抑制艾滋病毒HIV-1的基因表達(dá),從而抑制減少HIV-1的增殖。這表明抗菌肽對(duì)于當(dāng)今人類的頑癥———艾滋病也有抑制作用。

2.3抗菌肽的抗寄生蟲(chóng)作用及其機(jī)理抗菌肽可以有效地殺滅產(chǎn)生人類及動(dòng)物寄生蟲(chóng)病的寄生蟲(chóng),如瘧疾、Chagas氏病、萊什曼病等。目前發(fā)現(xiàn)一種合成的天蠶素-蜂毒素雜合體對(duì)萊什曼原鞭毛蟲(chóng)有損傷作用,起作用的靶目標(biāo)是細(xì)胞質(zhì)膜,它可以快速降低H-OH的通透性,破壞膜電勢(shì),質(zhì)膜形態(tài)也受到損壞。Shahabuddin[17]研究發(fā)現(xiàn)昆蟲(chóng)抗菌肽對(duì)感染蚊子的瘧原蟲(chóng)發(fā)育的不同時(shí)期有不同的作用,主要對(duì)瘧原蟲(chóng)的卵囊期和子孢子期造成明顯的損傷。

2.4抗菌肽對(duì)腫瘤細(xì)胞作用及其機(jī)理國(guó)內(nèi)外已對(duì)抗菌肽殺傷腫瘤細(xì)胞的作用進(jìn)行了廣泛研究,發(fā)現(xiàn)抗菌肽對(duì)體外培養(yǎng)的癌細(xì)胞的作用主要是使癌細(xì)胞膜上形成孔洞,內(nèi)容物外泄,線粒體出現(xiàn)空泡化,嵴脫落。核膜界限模糊不清,有的核膜破損,核染色體DNA斷裂,并抑制染色體DNA的合成,細(xì)胞骨架也受到一定程度的損傷[18,19]。通過(guò)對(duì)荷瘤小鼠的研究證明,抗菌肽能顯著抑制ECA腹水瘤荷瘤小鼠腹水的積累;對(duì)S180肉瘤和U14宮頸癌的抑瘤率亦達(dá)30%-50%[20]?？咕倪€可以調(diào)動(dòng)機(jī)體的免疫機(jī)能,從體液免疫方面來(lái)抵抗癌瘤的入侵。

3.抗菌肽基因的融合表達(dá)

抗菌肽的天然產(chǎn)量低,合成或從機(jī)體中提取步驟復(fù)雜、產(chǎn)率低、價(jià)格相當(dāng)昂貴,利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)抗菌肽具有重要意義?？咕乃鶖y帶的堿性氨基酸使其對(duì)蛋白酶非常敏感,必須采用融合表達(dá)策略以抵消其堿性并降低其對(duì)宿主細(xì)胞的毒性。

謝維等合成了家蠶抗菌肽CMIV基因,并將其克隆到金黃色葡萄球菌A蛋白和IgG親合的結(jié)構(gòu)域ZZ的融合表達(dá)載體中,得到Pezz318-CMIVV質(zhì)粒,以此質(zhì)粒轉(zhuǎn)化E.coliHB101,得到ZZ-CMIV融合表達(dá)的蛋白,用CBr切割后,得到CMIV肽。李秀蘭等[21]對(duì)天然抗菌肽CMIV的氨基酸序列作了50%的改動(dòng),根據(jù)E.coli偏愛(ài)的密碼子人工合成了肽基因片斷,重組到測(cè)序載體,再將此片斷重組到表達(dá)載體Pet28上進(jìn)行表達(dá),融合蛋白經(jīng)CNBr裂解后,具有與天然抗菌肽相同的生物活性。吳映雅等將柞蠶抗菌肽D基因連接在牛成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子cDNA的上游,在酵母中成功地得到了表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物具有抗菌活性和牛成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子的抗原性。Kevin等[22]HNP(humanneutrophilpeptide1)和CEME(syntheticcecropin/melittinhybrid)分別與GST(glutathione-S-transferase)、ORRF、IgG結(jié)合序列及SPA(staphylococcalproteinA)在E.coli或S.aureus中融合表達(dá),結(jié)果在S.aureus中雖實(shí)現(xiàn)了與SPA的融合分泌表達(dá),但表達(dá)產(chǎn)量較低;Zhang等[23]選擇RepA蛋白的序列作為抗菌肽的融合表達(dá)伴侶,并插入Histag等序列作為純化親和位點(diǎn),實(shí)現(xiàn)了在E.coli中的融合表達(dá)。ChristsnenB等研究中得到的融合抗菌肽的抗菌活性比其任何一個(gè)供體抗菌肽的活性都高。

4.抗菌肽轉(zhuǎn)基因研究

王志興等把大麥α-淀粉酶的信號(hào)肽序列和抗菌肽CecropinB基因或HhivaA基因構(gòu)成嵌合基因,并把此基因?qū)腭R鈴薯,結(jié)果加信號(hào)肽序列的CecropinB轉(zhuǎn)基因植株發(fā)青枯病延遲,病情指數(shù)降低。Yarus等[24]用顯微注射法將牛氣管抗菌肽基因轉(zhuǎn)入小鼠,轉(zhuǎn)基因鼠在牛氣管抗菌肽基因控制序列的驅(qū)動(dòng)下成功的表達(dá)了牛氣管抗菌肽,在鼠乳中的牛氣管抗菌肽對(duì)大腸桿菌具有抗菌活性。Reed等研究了以IL-2啟動(dòng)子/增強(qiáng)子控制轉(zhuǎn)基因鼠中抗菌肽的合成及隨后對(duì)布氏桿菌的抑制作用。Reed[25]構(gòu)建了這樣一個(gè)DN斷:Shivala片斷,SV40多腺苷酸化/剪切信號(hào)肽基因片斷,此片斷加到鼠IL-2基因5’側(cè)-593─110區(qū)域。在受精卵精前核時(shí)將此融合基因注入受精卵(微注射法),得到26系小鼠。RT-PCR檢測(cè):有兩系轉(zhuǎn)基因鼠,當(dāng)其脾淋巴細(xì)胞置于3.25mg/kg的conA(刀豆蛋白,一種抗原誘導(dǎo)物)時(shí),可以誘導(dǎo)產(chǎn)生成熟的ShivalamRNA。用一定量的布氏桿菌接種時(shí),有兩系小鼠遭到攻擊。四星期后,在轉(zhuǎn)基因鼠脾臟組織布氏桿菌比非轉(zhuǎn)基因鼠少得多(P<0.05)。DavidWinder等[26]把編碼Ceropin或Melittin的基因放置在MLV(鼠白血病病毒)的啟動(dòng)子下,轉(zhuǎn)染到EJ細(xì)胞(人膀胱癌細(xì)胞),然后把這些細(xì)胞注入到裸鼠內(nèi),發(fā)現(xiàn)這些腫瘤細(xì)胞停止生長(zhǎng)或生長(zhǎng)減弱DavidWinder等用PCR擴(kuò)增,Prepromelittin(PPM前蜂毒素原),Premelittin(PM前蜂毒素)和Prececroppin(PC前抗菌肽)三種核酸片斷,均置于MLV啟動(dòng)子下構(gòu)建融合基因轉(zhuǎn)染進(jìn)EJ細(xì)胞。三種類型的EJ細(xì)胞分別注入裸鼠后,測(cè)定50d后的腫瘤生長(zhǎng)情況,無(wú)抗菌肽基因片斷的EJ細(xì)胞(對(duì)照組)致瘤率為70%,帶Cecropin基因片斷的EJ細(xì)胞致瘤率只有39%,PPM為50%,PM為65%,其抑制腫瘤的效果明顯。

5.抗菌肽的應(yīng)用前景

目前,大部分植物抗菌肽是從植物種子中分離獲得的,它們可以保護(hù)植物組織和種子不受真菌病原菌的侵害,但是植物抗菌肽對(duì)大部分細(xì)菌無(wú)抑制活性。因此,依靠基因工程的方法用其它真核生物的抗菌肽基因來(lái)轉(zhuǎn)化農(nóng)作物,培育抗病新品種是當(dāng)前國(guó)內(nèi)外研究的一個(gè)熱點(diǎn)。

動(dòng)物抗菌肽和干擾素、補(bǔ)體一樣是機(jī)體非特異性天然防御系統(tǒng)的重要組成部分。機(jī)體受損傷或病原微生物入侵時(shí),能迅速產(chǎn)生抗菌肽來(lái)殺傷入侵者,它對(duì)正常真核細(xì)胞幾乎沒(méi)有作用。另外,因?yàn)榭咕牡暮铣伤俣确浅？?假定核糖體上肽鍵合成速率不變,抗菌肽的產(chǎn)生比IgM要快100多倍),［27］而且小肽的擴(kuò)散比大的蛋白質(zhì)和免疫細(xì)胞更加迅速,作用更顯靈活,所以Boman曾指出,抗菌肽是機(jī)體的一種理想的一線防御物。與普通抗生素相比,抗菌肽的“抗菌譜”更廣,除了抗細(xì)菌外,有的抗菌肽還能作用于真菌、原蟲(chóng)、有包膜的病毒及癌細(xì)胞(對(duì)癌細(xì)胞的選擇性作用可能與其細(xì)胞骨架的改變有關(guān)),同時(shí)能加速免疫和傷口愈合過(guò)程。這預(yù)示抗菌肽在治療及預(yù)防癌癥和抗病毒、抗感染等方面具有良好的應(yīng)用前景。更為重要的是,由于抗生素的濫用導(dǎo)致菌株產(chǎn)生了抗性,人們需要尋找新的抗菌藥劑。抗菌肽這種從生物體中獲得的物質(zhì)恰巧具有獨(dú)特的抗菌機(jī)理,不是像一般的抗生素那樣通過(guò)阻斷生物大分子的生物合成來(lái)發(fā)揮作用,因而極有希望開(kāi)發(fā)成為一類新型的廣譜高效抗菌藥物。

隨著研究工作的進(jìn)一步深入,可以預(yù)見(jiàn),抗菌肽及其基因工程在醫(yī)藥、衛(wèi)生、食品工業(yè)及農(nóng)業(yè)等方面將會(huì)發(fā)揮更為重要的作用。另外,有些抗菌肽分子中含有D-氨基酸,這也為研究D-氨基酸如何在核糖體上合成多肽提供了一個(gè)理想的模式體系。

6.研究展望及存在問(wèn)題

抗菌肽是哺乳動(dòng)物防御系統(tǒng)的一個(gè)重要組成部分,具有熱穩(wěn)定、水溶性好、廣譜殺菌甚至有的能殺真菌、原蟲(chóng)等優(yōu)點(diǎn),而且許多抗菌肽在100℃加熱10min條件下仍能保持一定活力,且對(duì)較大的離子強(qiáng)度和較低或較高的pH都有較強(qiáng)的抗性,而對(duì)真核細(xì)胞幾乎無(wú)作用,僅作用于原核細(xì)胞和發(fā)生病變的真核細(xì)胞,并且與抗生素通過(guò)阻斷大分子生物合成的作用機(jī)制完全不同,病源菌不易對(duì)其產(chǎn)生耐藥性,由此顯示了它具有獨(dú)特的研究和應(yīng)用價(jià)值。近20年來(lái),人們對(duì)昆蟲(chóng)抗菌肽已進(jìn)行了比較系統(tǒng)的理論和應(yīng)用研究,但有關(guān)畜禽抗菌肽基因工程應(yīng)用研究方面的報(bào)道較少。從哺乳動(dòng)物抗菌肽特有的性質(zhì),顯示了它具有以下幾個(gè)方面在畜牧生產(chǎn)上的研究和應(yīng)用前景。研究展望及存在問(wèn)題

6.1藥用前景隨著傳統(tǒng)抗生素的廣泛及長(zhǎng)期的應(yīng)用,許多病源菌對(duì)它們產(chǎn)生了耐藥性,而具有廣譜抗菌且有獨(dú)特的抗菌機(jī)制的抗菌肽顯然在這方面的應(yīng)用研究中具明顯優(yōu)勢(shì)。隨著對(duì)抗菌肽結(jié)構(gòu)與活性的關(guān)系、抗菌肽作用機(jī)制及其基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制認(rèn)識(shí)的不斷深化,設(shè)計(jì)一種高效的、有利于人類健康的抗菌肽作抗生素替代品是完全可行的。

6.2轉(zhuǎn)基因研究及應(yīng)用仔豬腹瀉、奶牛炎及各種病毒性疾病如豬瘟、雞新城疫等一直是棘手的疾病,不利于畜牧業(yè)的發(fā)展。借鑒已成功的昆蟲(chóng)抗菌肽轉(zhuǎn)基因工程,如轉(zhuǎn)基因蚊子、轉(zhuǎn)基因馬鈴薯、轉(zhuǎn)基因水稻等,把特異的抗菌肽基因轉(zhuǎn)入畜禽特定細(xì)胞讓其表達(dá),從而產(chǎn)生抗病新品種,不失為一條發(fā)展畜牧生產(chǎn)的新思路,前景深遠(yuǎn)。

6.3抗菌肽基因表達(dá)調(diào)控及抗菌肽添加劑研究研究表明,［28］抗生素添加劑的使用嚴(yán)重破壞了動(dòng)物腸道的微生物平衡,并易在動(dòng)物體內(nèi)殘留,嚴(yán)重影響了畜產(chǎn)品的品質(zhì)和人類的健康。用基因工程方法生產(chǎn)環(huán)保型抗菌肽添加劑,或者,通過(guò)日糧因素調(diào)控抗菌肽基因的表達(dá)而達(dá)到畜產(chǎn)品無(wú)抗素化值得進(jìn)一步研究。

然而,由于抗菌肽分子小,分離提純存在一定的困難,故天然資源有限?；瘜W(xué)合成和基因工程法獲得抗菌肽是主要手段,但化學(xué)合成抗菌肽成本高,而通過(guò)基因工程在微生物中直接表達(dá)抗菌肽基因,則可能對(duì)宿主有害而不能獲取表達(dá)產(chǎn)物。所以,對(duì)抗菌肽的結(jié)構(gòu)、構(gòu)效關(guān)系及作用機(jī)理還需進(jìn)一步研究。

7.結(jié)束語(yǔ)

抗菌肽是生物體對(duì)外界病原物質(zhì)侵染而產(chǎn)生的一系列免疫應(yīng)答反應(yīng)產(chǎn)物,它的出現(xiàn)為人們尋找理想的抗菌藥物提供新的領(lǐng)域,尤其是當(dāng)今許多抗生素產(chǎn)生了耐藥性,因此抗菌肽具有巨大的應(yīng)用潛力?；蚬こ碳夹g(shù)的發(fā)展,極大的促進(jìn)了抗菌肽的研究和開(kāi)發(fā),通過(guò)抗菌肽基因的克隆與表達(dá)而大量生產(chǎn)成為可能。雖然抗菌肽目前還不能直接應(yīng)用于養(yǎng)殖業(yè),但抗菌肽獨(dú)特的作用機(jī)理不易產(chǎn)生耐藥性的特性將吸引科研工作的不斷深入,可以相信抗菌肽將在動(dòng)物養(yǎng)殖和提高畜產(chǎn)品品質(zhì)方面發(fā)揮重要作用。

參考文獻(xiàn)

［1］.HancockREW.TheLancet,1997,349(9049):418

［2］.STEINERHD,HULTMARKA。,ENGSTR¨OMH,etal.Sequenceandspecificityoftwoantibacterialtwoantibacterialproteinsinvolvedininsectimmunity[J].Nature,1981,292:246-248.

［3］.CAMMUEBP,DEBOLLEMF,SCHOOFSHM,etal.Gene-encodedantimicrobialpeptidesfromplants[J].CibaFoundSymposium,1994,186:91-106.

［4］.LAMBERTYM.InsectimmunityisolationfromthelepidopteeranHeliothisvirescensofanovelinsectdefensinwithpotentantifungalactivity[J].JbiolChem,1999,274:9320-9326

［5］.李文楚,黃自然.昆蟲(chóng)抗菌肽及其基因工程、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物[M].廣州:廣東科學(xué)技術(shù)出版社,1996.118-128.

［6］.鄭青,鮑時(shí)翔,姚汝華,等.新型抗菌肽基因設(shè)計(jì)、合成及在酵母中表達(dá)Ⅰ———雜合抗菌肽基因的設(shè)計(jì)與合成[J].華南理工大學(xué)學(xué)報(bào),1998,26(3):60-63.

［7］.ZaslofM,etal.ProcNatlAcadSciUSA,1987,84:5449～5455.

［8］.BAgerberth,JYLee,etal.EuropeanJournalofBiochemistry,1991,202:849～854.

［9］.陳留存,王金星.生物工程進(jìn)展,1999,19(5):55～59.

［10］.饒賢才,胡福泉,等.生命的化學(xué),2001,21(5):357～359.

［11］.MarchiniD,etal.[J].InsectBiochemMolBiol,1993,23(5):591-598.

［12］.RadermacherSW,etal.[J].JneurosiRes,1993,36(6):657-662.

［13］.LockeyTD,eral.[J].EurJBiochem,1996,236(1):236-271.

［14］.SaberoalG,.etal.[J].BiochemBiophysActa,1994,1197(2):109-131.

［15］.GazitE,etal.[J].Biochemistry,1994,33(35):10681-10692.

［16］.MariamE.etal.[J].InternationalJofAntimicrobialAgents,1999,13:57-60.

［17］.ShahabuddinM,etal.[J].ExperimentalParasitogy,1998,89(1):103-112.

［18］.王芳,等.[J].生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展,1998,25(1):64-67.

［19］.賈紅武,等.[J].蠶業(yè)科學(xué),1996,22(4):62.

［20］.許玉澄,等.[J].動(dòng)物學(xué)研究,1998,19(4):263-268.

[21].李秀蘭等.家蠶抗菌肽CMIV基因結(jié)構(gòu)改造及表達(dá)產(chǎn)物的研究[J].中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào),1999,15(3):

387-391.

［22］.KevinLP,MelissaHB,RoberEW.RecombinantDNAproceduresforproducingsmallantimicrobialcationicpeptideinbacteria[J].Gene.1993,134:7-13.

［23］.ZhangL,FallaT,WuM,etal.Determintsofrecombinantproductionofantimicrobialcationicpeptidesandcreationofpeptidevariantinbacteria[J].mun.1998,247:674-680.

［24］.YarusS,RosenJM,ColeAM,etal.Productionofactivebovinetra-chealantimicrobialpeptideinmilkoftransgenicmice[J].ProcNatlAcadSciUSA.1996,93:14118-14121.

［25］.RddeWA,ElzerPH,EnrightFM,etal.Interleukin2promoer/enhancecontrolledexpressionofasyntheticcecropin-classlyticcpeptideintransgenicmiceandsubsequentresistancetoBrucellaSabortus[J].TransgenicResearch.

1997,6:337-347.

［26］.DavidW,WaterH,GunzburJ,etal.Expressionofantimicrobialpeptideshasanantitumoureffectinghumancell[J].Biochem

篇4

另外，積極開(kāi)展院前溶栓以最大程度發(fā)揮溶栓治療的優(yōu)勢(shì)，盡早開(kāi)通閉塞血管，急性心肌梗死診治的啟動(dòng)時(shí)間需要前移，應(yīng)將院前急救納入到綠色通道體系的建設(shè)中來(lái)。 

心肺復(fù)蘇實(shí)施又有新指南 

美國(guó)心臟學(xué)會(huì)（AHA）公布了2015版心肺復(fù)蘇指南，主要內(nèi)容如下。 

醫(yī)護(hù)人員一旦發(fā)現(xiàn)患者沒(méi)有反應(yīng)，必須立即呼救，同時(shí)檢查呼吸和脈搏，然后再啟動(dòng)應(yīng)急反應(yīng)系統(tǒng)或請(qǐng)求支援。 

胸外按壓頻率修訂為100～120次/min；2010版指南僅僅規(guī)定了每分鐘按壓頻率≥100次/min，現(xiàn)要求施救者應(yīng)該以適當(dāng)?shù)乃俾剩?00～120次/min）和深度進(jìn)行有效按壓，同時(shí)盡可能減少胸部按壓中斷的次數(shù)和持續(xù)時(shí)間。 

胸外按壓深度：首次規(guī)定按壓深度的上限，在胸外按壓時(shí)，按壓深度至少5cn，但應(yīng)避免：>6 cm；2010版指南僅僅規(guī)定了按壓深度>/5cm，而新指南則認(rèn)為，按壓深度不應(yīng)>6 cm，超過(guò)此深度可能會(huì)出現(xiàn)并發(fā)癥，并提出大多數(shù)情況下，胸外按壓不是過(guò)深，而是過(guò)淺；對(duì)于兒童，按壓深度約為胸部前后徑的1/3，相當(dāng)于嬰兒4 cm，兒童5 cm左右；對(duì)于青少年應(yīng)采用成人的按壓深度，即5～6cm。 

為保證每次按壓后使胸廓充分回彈，施救者在按壓間隙，雙手應(yīng)離開(kāi)患者胸壁。如果在2次按壓之間，施救者與患者胸壁存在接觸，有可能會(huì)妨礙患者的胸壁回彈。 

關(guān)于先除顫還是先胸外按壓的爭(zhēng)議，2010版指南認(rèn)為，當(dāng)可以立即取得體外自動(dòng)除顫器（AED）時(shí)，應(yīng)盡快使用除顫器。當(dāng)不能立即取得AED時(shí)，應(yīng)立即開(kāi)始心肺復(fù)蘇，并同時(shí)讓人獲取AED，視情況盡快嘗試進(jìn)行除顫。 

當(dāng)患者的心律不適合進(jìn)行電除顫時(shí)，應(yīng)盡早給予腎上腺素。高血壓治療新認(rèn)識(shí) 

治療時(shí)機(jī) 目前認(rèn)為，對(duì)于>160歲的老年患者，當(dāng)血壓≥150/90 mmHg時(shí)可考慮啟動(dòng)藥物治療；年齡<60歲者和（或）糖尿病與慢性腎病患者，血壓≥140/90 mmHg即考慮啟動(dòng)降壓藥物治療。 

治療藥物 臨床上常用的降壓藥物主要包括噻嗪類利尿劑、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑（ACEI）、血管緊張素受體阻滯劑（ARB）以及鈣通道阻滯劑（CCB）和B受體阻滯劑（BB），過(guò)去認(rèn)為這5類藥物均可用于高血壓患者的首選治療。但近來(lái)研究認(rèn)為，BB雖然能夠有效降低血壓，但其預(yù)防心血管事件（特別是卒中）的效果弱于其他4類藥物，因而不建議其作為一線降壓藥物使用。 

降壓目標(biāo) 對(duì)血壓的控制目標(biāo)，認(rèn)為>60歲高血壓患者血壓應(yīng)控制在<150/90 mmHg，合并糖尿病或慢性腎病的患者，血壓控制在<140/90 mmHg即可。 

若經(jīng)過(guò)初步治療患者血壓不能達(dá)標(biāo)，可采取以下3種策略之一：①先選用1種藥物治療，逐漸增加至最大劑量，若血壓仍不能達(dá)標(biāo)則加用第2種藥物；②先選用1種藥物治療，血壓不達(dá)標(biāo)時(shí)不增加該藥劑量，而是聯(lián)合應(yīng)用第2種藥物；③若患者基礎(chǔ)血壓≥160/100 mmHg，或其血壓超過(guò)目標(biāo)血壓20/10 mmHg，可直接啟動(dòng)2種藥物聯(lián)合治療（自由處方聯(lián)合或用單片固定劑量復(fù)方制劑）。若經(jīng)上述治療血壓未能達(dá)標(biāo)，應(yīng)指導(dǎo)患者繼續(xù)強(qiáng)化生活方式的改善，同時(shí)視患者具體情況，嘗試增加藥物劑量或藥物種類（僅限于噻嗪類利尿劑、ACEI、ARB和CCB 4種藥物，但不建議聯(lián)合應(yīng)用ACEI與ARB）。經(jīng)上述調(diào)整血壓仍不達(dá)標(biāo)時(shí)，可考慮增加其他藥物（如B受體阻滯劑、醛固酮拮抗劑等）。 

強(qiáng)調(diào)積極的早期創(chuàng)傷救治 

篇5

癌癥是人類健康的殺手，是否能較早診斷出癌癥的前期征兆是影響癌癥患者恢復(fù)的關(guān)鍵因素。眾所周知，在腫瘤發(fā)展的過(guò)程中，腫瘤組織或細(xì)胞會(huì)釋放出一些特異性的蛋白質(zhì)進(jìn)入循環(huán)體系，而這些特異性蛋白在血液中的含量水平標(biāo)志著腫瘤發(fā)展的階段，所以在生物醫(yī)學(xué)上常將這些特異性蛋白稱為腫瘤標(biāo)記物。臨床醫(yī)學(xué)上常將這些腫瘤標(biāo)記物的檢測(cè)作為臨床檢驗(yàn)和診斷的重要依據(jù)［1］。生物化學(xué)、酶聯(lián)免疫和分子生物學(xué)等多種方法已用于腫瘤標(biāo)記物的檢測(cè)，雖然這些方法具有較高的選擇性、準(zhǔn)確度，但是存在輻射威脅、耗時(shí)和費(fèi)用較高等缺點(diǎn)。由于免疫傳感器結(jié)合了免疫反應(yīng)的特異性分子識(shí)別和便利的檢測(cè)技術(shù)而得到研究者的普遍關(guān)注，故開(kāi)發(fā)快速而準(zhǔn)確的腫瘤標(biāo)記物的免疫傳感器成為生物醫(yī)學(xué)檢測(cè)的研究熱點(diǎn)。腫瘤標(biāo)記物一般分為以下幾類:酶、糖蛋白、粘糖蛋白、激素、免疫分子和癌基因等。臨床醫(yī)學(xué)實(shí)踐表明，甲胎蛋白(AFP)、降血鈣素(CT)、癌胚抗原(CEA)、人絨毛膜促性腺素(hCG)、前列腺特異抗原(PSA)、鱗狀上皮細(xì)胞抗原(SCCA)、神經(jīng)元特異性烯醇酶(NSE)和CA(CarcinomaAntigen)等均是典型的腫瘤標(biāo)記物［1］。如腸癌的腫瘤標(biāo)記物為CEA、CA19-9和CA24-2;前列腺癌的腫瘤標(biāo)記物為F-PSA、PSA和PAP。按照免疫傳感器檢測(cè)信號(hào)的不同，可分為電化學(xué)型、光學(xué)型和質(zhì)量敏感型等。

1．1電化學(xué)免疫傳感器

電化學(xué)免疫傳感器可再分為電位型、電容型和電流型。電位型傳感器在免疫傳感中應(yīng)用不多。梁茹萍等［2］利用戊二醛交聯(lián)CA15-3抗體的電位型免疫傳感器用于乳腺癌CA15-3的檢測(cè)，獲得了良好的檢出限(5U/mL)和穩(wěn)定性(30d)。Fu等［3］制備了40nm的氧化鐵納米柱修飾碳糊電極，用于固定CEA建立了測(cè)定CEA的電位型免疫傳感器。其線性范圍為1.5～80μg/L，檢出限為0.9μg/L。對(duì)臨床血液樣本的檢測(cè)結(jié)果與酶聯(lián)免疫法相符合。Zhou等［4］將納米金吸附在溶于PVC的鄰苯二胺的氨基上，制備了一種增塑的PVC膜的電位傳感器用于α-AFP的檢測(cè)。該傳感器的響應(yīng)時(shí)間短(4min)、檢出限低(1.6μg/L)。但電位型免疫傳感器的不足之處在于:信噪比較低，線性范圍窄，非特異性抗體-抗原作用及背景信號(hào)較高。電容型免疫傳感器是一種高靈敏非標(biāo)記型免疫傳感技術(shù)。在電容型免疫傳感器的制作中，傳感界面的構(gòu)建和生物識(shí)別層的固定是影響其性能的重要因素?？刹捎冒雽?dǎo)體氧化物膜、自組裝單分子膜、電聚合膜、溶膠凝膠膜和等離子體聚合膜等來(lái)構(gòu)建電容型免疫傳感器。Fernandez-Sanchez等［5］研制了可以用于檢測(cè)PSA的免疫傳感器。他們將對(duì)pH敏感的聚合物附著在電化學(xué)傳感器的表面，用于快速而靈敏地檢測(cè)親和反應(yīng)過(guò)程中的電容及阻抗變化，實(shí)現(xiàn)了對(duì)PSA的靈敏檢測(cè)。Quershi等［6］在納米晶鉆(NCD)-interdigitatedgold(GID)電極表面固載抗體，進(jìn)而通過(guò)電容法測(cè)定心血管標(biāo)記物CRP。結(jié)果表明，電容器的靈敏度表現(xiàn)在兩個(gè)方面，一是當(dāng)抗體與抗原結(jié)合后，極化常數(shù)和弛豫時(shí)間常數(shù)明顯增大，二是傳感器的靈敏度與抗體濃度及施加頻率緊密相關(guān)。袁若等［7］報(bào)道了一種在玻碳電極表面修飾金納米粒子，進(jìn)而吸附CEA抗體，用鐵探針離子的阻抗特性來(lái)檢測(cè)CEA，獲得了良好的檢出限和靈敏度。

Rajesh等［8］在ITO修飾電極上利用自組裝膜固定α-CRP，利用電化學(xué)阻抗法檢測(cè)α-CRP抗體與抗原的親和作用，其檢出限達(dá)到3.5μg/L。由于電容法和阻抗法可以獲取直接、非標(biāo)記的親和信號(hào)，所以在臨床診斷上具有良好的發(fā)展前景。但電容法存在的問(wèn)題在于響應(yīng)電容易受到非特異性吸附的影響，其重現(xiàn)性不如法拉第阻抗法與伏安法。所以如何優(yōu)化傳感界面，改善響應(yīng)電容的重現(xiàn)性和穩(wěn)定性仍是電容型免疫傳感器發(fā)展中的關(guān)鍵問(wèn)題。電流型免疫傳感器備受研究者的關(guān)注。由于大多數(shù)待測(cè)物不能直接參與電化學(xué)反應(yīng)，常采用加入電子媒介體和標(biāo)記酶來(lái)催化底物轉(zhuǎn)化為電活性物質(zhì)來(lái)制備傳感器。雖然加入電子媒介體會(huì)降低檢出限，但其分離和洗滌步驟限制了它在生物醫(yī)學(xué)上的廣泛應(yīng)用。而基于標(biāo)記酶的直接電子傳遞的免疫傳感器則簡(jiǎn)化了分離和洗滌步驟，在生物醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用更有吸引力。鞠幌先研究組曾對(duì)腫瘤標(biāo)記物的電流型傳感器進(jìn)行了深入的研究［9-12］。如將硫堇和HRP標(biāo)記的CEA抗體通過(guò)戊二醛交聯(lián)在電極表面，制成了一種具有良好穩(wěn)定性的傳感器。該傳感器減少了加入電子媒介體的麻煩，并且不需乳化和洗滌，線性范圍為0.5～3.0和3.0～167μg/L，檢出限為0.1μg/L，重現(xiàn)性良好［10］。他們還研究了基于HRP的直接電子傳遞的免疫CEA傳感器，對(duì)CEA的檢出限為0.3μg/L，并將實(shí)際樣品的檢測(cè)結(jié)果與臨床檢測(cè)方法相比照，獲得了滿意的結(jié)果［12］。除此之外，研究人員還結(jié)合納米粒子的電子傳導(dǎo)、絲網(wǎng)印刷技術(shù)、微流控裝置、毛細(xì)管電泳和流動(dòng)注射等技術(shù)對(duì)腫瘤標(biāo)記物的檢測(cè)進(jìn)行了研究。

Jin等［13］結(jié)合毛細(xì)管電泳和電化學(xué)檢測(cè)技術(shù)，對(duì)腫瘤標(biāo)記物CA125進(jìn)行了檢測(cè)。Kojima等［14］設(shè)計(jì)了一種包含36個(gè)Pt微電極的陣列，運(yùn)用不同的抗體來(lái)捕獲腫瘤標(biāo)記抗原，采用電化學(xué)免疫檢測(cè)技術(shù)實(shí)現(xiàn)了多標(biāo)記物的同時(shí)檢測(cè)。Wilson等［15］采用雙電極的免疫傳感器同時(shí)采用安培法測(cè)定了CEA和AFP，獲得了1μg/L的低檢出限，并有效抑制了交叉干擾。研究表明，這些新技術(shù)在免疫傳感器中的引入，不僅降低了待測(cè)物的檢出限，而且可以有效降低共存物質(zhì)的干擾，并可實(shí)現(xiàn)多通道同時(shí)檢測(cè)多種腫瘤標(biāo)記物。由于納米材料的獨(dú)特性質(zhì)，使其在實(shí)時(shí)、靈敏檢測(cè)標(biāo)記物方面具有廣泛的應(yīng)用前景。如Zheng等［16］利用抗體功能化的二氧化硅納米線制備了一種新型傳感器，用于在血漿中的癌癥標(biāo)記物的非標(biāo)記實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。Ramanathan等［17］和Willner等［18］曾報(bào)道利用聚合物納米線和碳納米管進(jìn)行相關(guān)生物親和體系內(nèi)標(biāo)記物的檢測(cè)。Wu等［19］將CEA/納米金通過(guò)殼聚糖固定在絲網(wǎng)印刷電極上，結(jié)合流動(dòng)注射法建立了一種快速而方便的CEA電化學(xué)免疫傳感器，CEA檢測(cè)的線性范圍為0.50～25μg/L，檢出限為0.22μg/L。該傳感器通過(guò)流動(dòng)注射HRP-anti-CEA，故可以控制乳化時(shí)間，并易于自動(dòng)化。Wang等［20］將聚鳥(niǎo)嘌呤功能化的二氧化硅納米粒子標(biāo)記壞疽抗體的夾心型傳感器用于壞疽因子的電化學(xué)測(cè)定，可直接用于生物樣品中壞疽因子的檢測(cè)，檢出限為2.0pmol/L。Chen等［21］在玻碳電極表面氣相沉積納米金/硅溶膠，將HRP功能化的hCG抗體固定于其上，建立了一種無(wú)試劑的電化學(xué)免疫傳感器用于hCG的靈敏檢測(cè)，其檢出限為0.3mIU/mL。Wang等［1］對(duì)近年來(lái)功能化碳納米管在腫瘤標(biāo)記物上的應(yīng)用進(jìn)行了綜述。#p#分頁(yè)標(biāo)題#e#

1．2光學(xué)免疫傳感器

由于光學(xué)免疫傳感器具有非破壞性操作、快速獲取信號(hào)及使用可見(jiàn)光輻射等優(yōu)勢(shì)，故在腫瘤標(biāo)記物的檢測(cè)中占有重要地位。根據(jù)其檢測(cè)原理，光學(xué)免疫傳感器可分為熒光、化學(xué)發(fā)光和表面等離子體共振等類型。近年來(lái)，熒光檢測(cè)在臨床診斷和檢測(cè)中獲得了很大的進(jìn)展。Nakamura等［35］結(jié)合流動(dòng)注射系統(tǒng)和陽(yáng)離子交換樹(shù)脂毛細(xì)管柱制備了hCG免疫傳感器。利用離子交換柱來(lái)分離FITC-IgG和FITC-IgG抗體，然后利用熒光檢測(cè)hCG，其線性范圍為25～1500mIU/mL。Yan等［36］將免疫親和反應(yīng)柱與流動(dòng)注射體系相連接，然后通過(guò)時(shí)間分辨熒光免疫檢測(cè)法進(jìn)行CEA的測(cè)定(如圖1所示)。納米材料特別是量子點(diǎn)的引入，使熒光型生物傳感器的發(fā)展尤為引人矚目，Zhong［37］對(duì)近年來(lái)基于熒光生物傳感中納米材料的應(yīng)用進(jìn)行了綜述。Hong等［38］對(duì)納米金、溶劑對(duì)熒光團(tuán)的熒光效應(yīng)進(jìn)行了比較研究，發(fā)現(xiàn)納米金試劑的熒光增強(qiáng)效應(yīng)可以使腫瘤標(biāo)記物的檢出限降低10倍，并且對(duì)心血管標(biāo)記物CRP的檢出限可低至數(shù)10pmol。化學(xué)發(fā)光免疫傳感器多采用直接化學(xué)發(fā)光、化學(xué)發(fā)光基底標(biāo)記和酶標(biāo)記等3種技術(shù)。但大多數(shù)化學(xué)發(fā)光免疫傳感器是利用酶增大檢測(cè)信號(hào)，并與流動(dòng)注射系統(tǒng)相結(jié)合來(lái)提高其檢測(cè)自動(dòng)化性能。Ju等［39］對(duì)化學(xué)發(fā)光免疫傳感器的自動(dòng)化進(jìn)行了較多研究，并對(duì)近年來(lái)電化學(xué)發(fā)光傳感器在腫瘤標(biāo)記物方面的應(yīng)用進(jìn)行了綜述。

Jie等［40］首次以gold/silica/CdSe-CdS雜交納米結(jié)構(gòu)制備了靈敏的電化學(xué)發(fā)光生物傳感器，用于測(cè)定CEA，獲得了良好的效果。雖然化學(xué)發(fā)光免疫傳感器的靈敏度高，選擇性好，但是改善腫瘤標(biāo)記物的固定化技術(shù)和傳感器的微型化、集成化仍是化學(xué)發(fā)光免疫傳感器的發(fā)展方向。表面等離子體共振(SPR)是利用金屬膜/液面界面光的全反射來(lái)分析生物分子相互作用的一項(xiàng)新興技術(shù)，生物傳感芯片是SPR傳感器的核心部分。它對(duì)免疫特異識(shí)別、蛋白質(zhì)折疊機(jī)理、生物特異相互作用的結(jié)合位點(diǎn)及濃度分析上具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，并且可以獲得很低的檢出限(10－13～10－9mol/L)?？蓪?shí)時(shí)監(jiān)測(cè)生物大分子之間的相互作用及其影響因素的作用環(huán)節(jié)，成為疾病診斷和機(jī)理研究的有效工具。Chou等［41］將抗人鐵蛋白單克隆抗體固定在SPR敏感的金表面，建立了人鐵蛋白的SPR免疫傳感器，可以測(cè)定非特異性腫瘤標(biāo)記物人鐵蛋白。Yu等［42］基于表面等離子體的衍射建立了hCG的免疫傳感器。Corso等［43］將抗體通過(guò)自組裝膜固定在金表面，建立了一種實(shí)時(shí)靈敏監(jiān)測(cè)胰腺癌的腫瘤標(biāo)記物間皮蛋白的聲波免疫傳感器，可以檢測(cè)納克級(jí)的間皮蛋白(mesothelin)。近年來(lái)，諸多研究集中在如何克服SPR傳感器檢測(cè)小分子靈敏度低的問(wèn)題，相信隨著SPR傳感器在腫瘤標(biāo)記物研究上的深入，其在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用將更為廣泛。

1．3質(zhì)量型免疫傳感器

石英晶體微天平(QCM)型免疫傳感器由于其非標(biāo)記和實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)的特點(diǎn)使其在腫瘤標(biāo)記物的檢測(cè)中也有較多應(yīng)用。Zhang等［44］制備了一種2×5模式的多通道壓電QCM用于檢測(cè)血液和尿液中的hCG，其檢測(cè)效率高，比單通道檢測(cè)的速度快8倍以上。Kim等［45］在微芯片上制備了檢測(cè)心血管標(biāo)記物CRP的QCM免疫傳感器，對(duì)CRP的檢測(cè)線性范圍寬，達(dá)到0.13～25016μg/L，檢出限為0.13μg/L。

1．4免疫傳感器在多分析物同時(shí)檢測(cè)中的應(yīng)用

在醫(yī)學(xué)臨床診斷中，某一種非特異性腫瘤標(biāo)記物的值升高并不能確診癌癥，常需要進(jìn)行多個(gè)腫瘤標(biāo)記物的同時(shí)檢測(cè)，才能獲得準(zhǔn)確的診斷結(jié)果［1］。Matsumoto等［46］報(bào)道了一種利用時(shí)間分辨熒光免疫傳感器同時(shí)測(cè)定α-AFP和CEA，他們采用Eu標(biāo)記的抗AFP抗體及Sm-標(biāo)記的親和素來(lái)測(cè)定α-AFP和CEA，獲得了較低的檢出限，它們的檢出限分別為0.07和0.3μg/L，并在實(shí)際樣品的測(cè)定中獲得了良好的準(zhǔn)確度。Song等［47］用微分析系統(tǒng)熒光免疫傳感器同時(shí)測(cè)定了CEA、AFP、β-HCG、CA125、CA19-9和CA15-3，均獲得了較寬的線性范圍，對(duì)于CEA、AFP、β-HCG為0～640μg/L，對(duì)于CA125、CA19-9和CA15-3為0～1280μg/L。Kojima等［14］將捕獲抗體固定在雙層硅氧烷層中，制備了微蛋白質(zhì)芯片用于AFP和β2-微球蛋白的電化學(xué)免疫檢測(cè)，由于采用了夾心型的結(jié)構(gòu)，有效降低了酶催化產(chǎn)物的擴(kuò)散而獲得較高的靈敏度。Wu等［48］用醋酸纖維素共固定硫堇和2種抗原于絲網(wǎng)印刷芯片的碳電極上，用于CA19-9和CA125的電化學(xué)免疫測(cè)定，其檢出限分別為0.2和0.4U/mL。Fu等［49］采用雙通道體系化學(xué)發(fā)光免疫同時(shí)檢測(cè)α-AFP和CEA，對(duì)α-AFP和CEA的檢出限分別達(dá)到1.5和0.25μg/L。Wilson等［50-52］將微芯片技術(shù)與電化學(xué)免疫結(jié)合，分別進(jìn)行了CEA、AFP，4種不同的蛋白質(zhì)及7種腫瘤標(biāo)記物的同時(shí)檢測(cè)。他們采用多個(gè)IrOx傳感器來(lái)降低酶催化產(chǎn)物的擴(kuò)散，進(jìn)而在電極上獲得良好的電化學(xué)響應(yīng)，并獲得了較低的檢出限。Qureshi等［53］利用GID電極電容法同時(shí)檢測(cè)抗CRP、α-TNF和IL6，其檢測(cè)范圍為25pg/mL～25ng/mL，為心血管患者提供了良好的前期診斷。能同時(shí)檢測(cè)多個(gè)腫瘤標(biāo)記物的免疫傳感器及微流控芯片系統(tǒng)的應(yīng)用，在癌癥的預(yù)期診斷方面是現(xiàn)今重點(diǎn)發(fā)展的方向。

2適體生物傳感器

核酸適體是一種能夠與蛋白質(zhì)、小分子、離子、核酸、甚至整個(gè)細(xì)胞等目標(biāo)分子結(jié)合，通過(guò)指數(shù)富集的配位系統(tǒng)進(jìn)化技術(shù)(SELEX)經(jīng)體外篩選的人工合成寡聚核苷酸或肽分子。適配體還具有分子量小、易體外合成和修飾、化學(xué)穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)，常被稱為“化學(xué)抗體”，故一經(jīng)出現(xiàn)便成為化學(xué)工作者用于分子識(shí)別和靶標(biāo)物檢測(cè)研究的得力工具，為生物分析方法和傳感器的設(shè)計(jì)開(kāi)辟了新的思路［54］。核酸適體可形成一些穩(wěn)定的三維空間結(jié)構(gòu)，如發(fā)夾、假結(jié)、凸環(huán)和G-四鏈體等結(jié)構(gòu)。分子識(shí)別時(shí)，在目標(biāo)分析物誘導(dǎo)下單鏈核酸適體會(huì)折疊成特殊的二級(jí)結(jié)構(gòu)。常見(jiàn)的適體與靶體之間的作用有單位點(diǎn)結(jié)合和雙位點(diǎn)結(jié)合(夾心型)2種。研究表明，適配體的結(jié)構(gòu)稍有差異，則靶分子與其結(jié)合就受到阻礙［54］。顯然，適體的這些特點(diǎn)對(duì)于發(fā)展高靈敏、高選擇性和快速高通量的靶標(biāo)分子分析檢測(cè)十分重要，并日漸成為分析化學(xué)領(lǐng)域的研究和應(yīng)用熱點(diǎn)。研究人員已經(jīng)成功地創(chuàng)建了大量基于核酸適體的分析新方法，包括電化學(xué)法、熒光、比色法、壓電和SPR等［55-57］。

2．1電化學(xué)適體傳感器

電化學(xué)適體傳感器集合了核酸適體和電化學(xué)傳感器的優(yōu)勢(shì)，成為近年來(lái)的一個(gè)研究熱點(diǎn)。在阻抗型電化學(xué)適體傳感器中，適體的固定化程序至關(guān)重要。通常有混合自組裝膜和在自組裝膜上共價(jià)固定等幾種方法。Wang等［58］首次報(bào)道了識(shí)別誘導(dǎo)表面電荷轉(zhuǎn)換的FIS適體傳感器。結(jié)果表明，如果體系pH低于目標(biāo)蛋白pI，則蛋白質(zhì)的識(shí)別將扭轉(zhuǎn)表面電荷狀態(tài)，促進(jìn)電子轉(zhuǎn)移，因而會(huì)降低電荷轉(zhuǎn)移阻抗。Liao等［59］將適體固定在硅電極表面，用于檢測(cè)神經(jīng)炎細(xì)胞因子PDGF，建立了一種無(wú)試劑的阻抗生物傳感器，其檢出限達(dá)到40nmol/L。Kwon等［60］以抗血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)適體與羧基聚吡咯納米管構(gòu)建了場(chǎng)效應(yīng)晶體管用以測(cè)定VEGF，其檢出限為400fmol/L，可用于實(shí)時(shí)檢測(cè)VEGF。當(dāng)核酸適體與特定的蛋白質(zhì)結(jié)合時(shí)，有典型的構(gòu)型變換，而抗體則沒(méi)有這樣的性質(zhì)，利用這個(gè)性質(zhì)可以設(shè)計(jì)構(gòu)型變換型適體傳感器。通常，將適體信標(biāo)的一端修飾官能團(tuán)用于電極表面的固定化，另一端修飾電活性標(biāo)記物來(lái)產(chǎn)生電信號(hào)。電信號(hào)的大小是由活性標(biāo)記物與電極表面之間的距離決定的。Xiao等［61］將亞甲藍(lán)標(biāo)記的抗凝血酶適體固定在電極表面，制備了一種基于電化學(xué)開(kāi)關(guān)效應(yīng)測(cè)定凝血酶的生物傳感器(如圖3A所示)，但該種傳感器在靶分子與適體結(jié)合后信號(hào)減小。為了克服這個(gè)問(wèn)題，Radi等［62-63］設(shè)計(jì)了另一種開(kāi)關(guān)裝置用于凝血酶的測(cè)定(圖3B)。由于四鏈體的形成，二茂鐵與電極之間的距離大大減小而顯示出電化學(xué)信號(hào)。#p#分頁(yè)標(biāo)題#e#

由于適體的剛性較差，所以存在較大的背景信號(hào)，降低了信噪比和檢出限。Zuo等［64］將二茂鐵功能化的抗ATP適體固定在電極表面，在ATP存在下，互補(bǔ)序列解離而與ATP結(jié)合成三維的剛性結(jié)構(gòu)，進(jìn)而二茂鐵與電極表面發(fā)生電子傳遞，顯示出開(kāi)關(guān)的作用，ATP的檢測(cè)范圍較寬(10nmol/L～1mmol/L)并具有高的靈敏度(圖3C)。Fan等［65］將3'-端連有羧基二茂鐵的發(fā)卡式結(jié)構(gòu)DNA探針通過(guò)5'-巰基固定在金電極上，根據(jù)標(biāo)記物雜交前后與電極表面距離的變化進(jìn)行電化學(xué)檢測(cè)，對(duì)目標(biāo)DNA的檢出限達(dá)到1.0×10－11mol/L。他們將該方法應(yīng)用于PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的研究，該方法具有PCR擴(kuò)增產(chǎn)物無(wú)需后續(xù)純化、快速檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)。Chu等［66］提出了基于免疫-RCA的適體電化學(xué)傳感器用于PDGF-BB的超靈敏檢測(cè)。在電極表面形成抗體-PDGF-BB-適體-引物復(fù)合體這樣的三明治結(jié)構(gòu)后，引入一種與引物結(jié)合的“C”型掛鎖探針。該方法結(jié)合了滾環(huán)擴(kuò)增和酶催化兩步放大，實(shí)現(xiàn)了PDGF的超靈敏檢測(cè)，下限可達(dá)10fmol/L。Huang等［67］采用類似原理將PDGF-BB采用抗體和適體-引物捕獲到電極表面，通過(guò)嵌入MB產(chǎn)生電化學(xué)響應(yīng)，其檢測(cè)限為18pg/mL。這種基于靶分子的結(jié)合而引起構(gòu)型變換的電化學(xué)傳感器，提供了一種無(wú)試劑、再生和靈敏的方法用于復(fù)雜樣品中目標(biāo)分析物的檢測(cè)。一些平面分子如亞甲藍(lán)、Ru(NH3)3+6、功能化二茂鐵等也可以插入雙鏈DNA中并經(jīng)DNA堿基對(duì)π堆積實(shí)現(xiàn)電子轉(zhuǎn)移而被氧化，進(jìn)而利用特異性序列與蛋白質(zhì)的作用進(jìn)行電化學(xué)檢測(cè)。Jin等［68］利用5'-SH的發(fā)卡式結(jié)構(gòu)探針固定于金電極表面，用亞甲基蘭為雜交指示劑檢測(cè)P53基因，并對(duì)不同位置的單堿基錯(cuò)配序列進(jìn)行了研究。該方法無(wú)需對(duì)發(fā)卡式DNA探針進(jìn)行標(biāo)記，實(shí)驗(yàn)證明發(fā)卡式DNA探針有很高的雜交特異性，可以識(shí)別單堿基錯(cuò)配序列，并且錯(cuò)配堿基位于環(huán)中央時(shí)對(duì)雜交效率影響最大。

Zhang等［69］在金電極陣列上分別自組裝巰基發(fā)卡式DNA探針，采用亞甲藍(lán)為雜交指示劑，方波伏安法檢測(cè)了人體免疫缺陷蛋白HIV-1和HIV-2，對(duì)二者的檢出限均達(dá)到了0.1nmol/L。Mir等［70］對(duì)凝血酶的不同適體生物傳感器的制備方式對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響進(jìn)行了詳細(xì)的比較研究。適體在與靶標(biāo)分子特異性結(jié)合后，其三級(jí)結(jié)構(gòu)將發(fā)生改變，隨之發(fā)生變化的有適體的電荷密度、吸附性質(zhì)和空間位阻等一系列因素。采用納米材料不僅可以將上述這些變化因素轉(zhuǎn)化為可檢測(cè)的光學(xué)、電化學(xué)信號(hào)，而且還可以提高分析檢測(cè)的靈敏度。Numunuam等［71］首次以CdS量子點(diǎn)標(biāo)記二級(jí)適體，建立了夾心型電位法測(cè)定蛋白質(zhì)的電位傳感器，凝血酶的檢出限為0.14nmol/L。Hansen等［72］利用CdS量子點(diǎn)修飾適體建立了7種不同蛋白質(zhì)的同時(shí)電化學(xué)檢測(cè)，其檢出限為0.5pmol/L，而且具有良好的選擇性。該方法為超痕量的生物標(biāo)記物的檢測(cè)及腫瘤的早期診斷提供了可能。Polsky等［73］利用Pt納米粒子功能化的適配體進(jìn)行了凝血酶的電化學(xué)檢測(cè)。由于納米粒子對(duì)過(guò)氧化氫的催化還原，放大了電信號(hào)而使凝血酶的檢測(cè)限降低到納摩爾的水平。He等［74］將含有聚腺嘌呤序列的抗凝血酶適配體對(duì)納米金予以功能化，然后基于凝血酶與抗體的特異性作用固定在電極表面，然后腺嘌呤核糖酶降解釋放而直接在熱解石墨電極上檢測(cè)。由于納米粒子可以載帶較多的適配體，所以檢測(cè)靈敏度可以降低至0.1μg/L。Li等［75］在金電極上預(yù)先修飾2種分別含有腺苷酸和凝血酶的適體，捕獲探針預(yù)先用納米金及硫化物納米粒子固定的DNA鏈雜交，構(gòu)成了一種夾心型的傳感器用于腺苷酸和凝血酶的陽(yáng)極溶出伏安測(cè)定，其檢出限分別為6.6×10－12和1.0×10－12mol/L。Velasco-Garcia等［76］和Hianik等［77］對(duì)適體電化學(xué)生物傳感器的研究進(jìn)展進(jìn)行了評(píng)述，并對(duì)其發(fā)展前景進(jìn)行了展望?？偟膩?lái)說(shuō)，雖然報(bào)道的多種構(gòu)建電化學(xué)適體傳感器的方法獲得了較為滿意的分析性能，但對(duì)電化學(xué)適體傳感器的分析性能和各項(xiàng)參數(shù)的研究和評(píng)價(jià)還不充分，在實(shí)際體系中的應(yīng)用也還需要拓展。

2．2光學(xué)適體傳感器

隨著能與蛋白質(zhì)等生物大分子特異結(jié)合的適體的篩選和發(fā)現(xiàn)，基于納米材料的比色技術(shù)日漸成為生物大分子識(shí)別和檢測(cè)的有力工具。由于適體-納米粒子的比色檢測(cè)靈敏度高、操作簡(jiǎn)單，因而對(duì)蛋白質(zhì)分析和癌癥的診斷具有重要意義。圖4為比色法測(cè)定蛋白質(zhì)的基本原理。Mao等［78］利用分子信標(biāo)的特異性識(shí)別特性和金納米粒子的光學(xué)特性，建立了快速、靈敏而價(jià)廉的檢測(cè)DNA的方法。Liu等［79］報(bào)道了一種納米粒子-適體的生物傳感器可直接用于血液中癌細(xì)胞拉莫斯細(xì)胞的比色法檢測(cè)，為循環(huán)系統(tǒng)的癌細(xì)胞提供了一種快捷靈敏的檢測(cè)方法，對(duì)癌癥的診斷和治療具有較大的作用。Lee等［80］利用SPR適體生物傳感器檢測(cè)視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP4)用于二型糖尿病的診斷。該種方法避免了傳統(tǒng)免疫學(xué)檢測(cè)的測(cè)定干擾，可直接用于血液中RBP4的檢測(cè)。Huang等［81］采用適體-納米金實(shí)現(xiàn)了對(duì)乳腺癌標(biāo)志物PDGF-AA、PDGF-AB、PDGF-BB的檢測(cè)，其檢出限均能達(dá)到納摩爾水平。Medley等［82］以適體修飾的金納米粒子實(shí)現(xiàn)了急性淋巴細(xì)胞白血病CCRF-CEM細(xì)胞的檢測(cè)，并使用伯基特淋巴瘤Ramos細(xì)胞做對(duì)比檢測(cè)，探針對(duì)靶標(biāo)細(xì)胞有特異識(shí)別，其檢出限為90個(gè)癌細(xì)胞。該納米比色探針的選擇性和靈敏度令人滿意。與傳統(tǒng)方法相比，比色法用于蛋白質(zhì)分子檢測(cè)有明顯優(yōu)勢(shì)，如所需藥品及材料均較廉價(jià)，避免了生物分析中的復(fù)雜修飾和分離，不僅保證了適體與靶分子的高度親和性，還極大地簡(jiǎn)化了分析檢測(cè)步驟，能很好的滿足對(duì)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的需求。相信這種方法將以其高靈敏、低成本和較簡(jiǎn)便等優(yōu)勢(shì)在生物分析和醫(yī)學(xué)檢測(cè)等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。與比色法相比，熒光法由于靈敏度高、特征參數(shù)多、動(dòng)態(tài)范圍寬和適體與納米粒子作用方式靈活多樣等優(yōu)點(diǎn)，而更具發(fā)展?jié)摿?。最常?jiàn)的光學(xué)分子信標(biāo)就是發(fā)卡式分子信標(biāo)，即適體序列的兩端分別標(biāo)記一個(gè)熒光團(tuán)和淬滅團(tuán)，當(dāng)靶分子與特異序列結(jié)合后，原本相近的熒光團(tuán)和淬滅團(tuán)分開(kāi)，進(jìn)而顯示出熒光信號(hào)。

另一種是在一個(gè)已知DNA序列上分別配合帶有熒光團(tuán)和淬滅團(tuán)的DNA序列，當(dāng)靶分子與適體進(jìn)行特異結(jié)合后，淬滅團(tuán)序列離開(kāi)，而顯示出熒光，并用于檢測(cè)靶分子［83］。Huang等［84］將與DNA具有親和性的DMDAP加入到PDGF適體修飾的納米金溶膠中發(fā)生熒光淬滅，靶分子PDGF的加入使DMDAP釋放到溶液中，進(jìn)而熒光恢復(fù)，實(shí)現(xiàn)了對(duì)PDGF的熒光檢測(cè)，其檢出限可達(dá)8pmol/L。量子點(diǎn)與適體的結(jié)合則大大提高了其在細(xì)胞研究中的功能，為癌細(xì)胞的影像診斷技術(shù)及細(xì)胞內(nèi)的藥物轉(zhuǎn)運(yùn)提供了可能。Bagalkot等［85］發(fā)展了由阿霉素、適體和CdSe/ZnS量子點(diǎn)組成的雙熒光共振能量轉(zhuǎn)移體系，并將其成功應(yīng)用于體外前列腺癌細(xì)胞的影像、治療和藥物運(yùn)輸。由于熒光檢測(cè)法固有的高度靈敏性和多種納米材料技術(shù)的使用，熒光生物傳感在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究將有更大的發(fā)展和應(yīng)用空間。Zhang等［86］將釕聯(lián)吡啶衍生物作為標(biāo)記物，連接到發(fā)卡式DNA上制成電化學(xué)發(fā)光探針，將其自組裝到金電極上構(gòu)成新型電化學(xué)發(fā)光傳感器，根據(jù)雜交前后電化學(xué)發(fā)光信號(hào)強(qiáng)度的不同進(jìn)行目標(biāo)序列的檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該發(fā)卡式DNA電化學(xué)發(fā)光傳感器有較高的雜交特異性，能夠識(shí)別單堿基和多堿基錯(cuò)配序列，檢出限為9×10－11mol/L。該傳感器具有較高的檢測(cè)靈敏度，且無(wú)需對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行標(biāo)記，有望應(yīng)用于疾病檢測(cè)等醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。Huang等［87］將含有15個(gè)堿基的巰基適體固定在金電極表面，用以結(jié)合凝血酶;另以29個(gè)堿基的生物素修飾的適體與凝血酶雜交形成夾心型結(jié)構(gòu)。用親和素修飾的量子點(diǎn)對(duì)生物素-親和素的作用進(jìn)行檢測(cè)，制備了一種新穎的化學(xué)發(fā)光適體傳感器。該傳感器對(duì)凝血酶的檢測(cè)線性范圍為0～20mUg/mL。Pollet等［88］首次將光纖SPR傳感器與DNA適體相結(jié)合制備了一種可重復(fù)使用、經(jīng)濟(jì)而非標(biāo)記的適體傳感器用于研究DNA雜交及DNA-蛋白質(zhì)之間的相互作用。該傳感器不僅可對(duì)DNA和蛋白質(zhì)進(jìn)行定量，而且還可以用于研究它們結(jié)合的動(dòng)力學(xué)常數(shù)。#p#分頁(yè)標(biāo)題#e#

2．3質(zhì)量型適體傳感器

篇6

馬紅球菌的微生物學(xué)

馬紅球菌最早稱為馬棒狀桿菌，曾歸屬棒狀桿菌屬。首次發(fā)現(xiàn)于1923年并命名為馬棒狀桿菌，后經(jīng)細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn)該菌與棒桿菌屬有較大差異，因此將其歸屬為紅球菌屬，命名為馬紅球菌［1］。其生長(zhǎng)速度較緩慢，在35℃培養(yǎng)24～72小時(shí)，才可見(jiàn)黏液狀、產(chǎn)生橙紅、橘紅色素的菌落。隨著生長(zhǎng)條件和生長(zhǎng)周期變化，它從球菌狀變化到桿菌(如馬紅球菌在固體培養(yǎng)基或膿液中呈球菌樣，但在液態(tài)培養(yǎng)基中則為無(wú)分枝的短絲狀或棒狀)。多形態(tài)性生長(zhǎng)是其特征。生長(zhǎng)反應(yīng)不活潑、不能分解任何糖、醇類，觸酶均為陽(yáng)性。不產(chǎn)芽胞、無(wú)動(dòng)力，為革蘭陽(yáng)性需氧菌。

馬紅球菌感染的流行病學(xué)

1923年在小馬駒肺部感染組織分離出馬紅球菌后，在多種水棲和陸棲動(dòng)物均可分離出馬紅球菌。該病源菌普遍存在于自然環(huán)境的土壤中，在50%～95%的農(nóng)場(chǎng)土壤中可以發(fā)現(xiàn)馬紅球菌，尤其是在疫區(qū)被動(dòng)物糞便污染的牧區(qū)土壤中很容易分離出此菌。但從人類疾病中分離出該菌卻始1970年。一般認(rèn)為可致人類的機(jī)會(huì)性感染，特別是免疫功能低下者。馬紅球菌致人類感染以呼吸道感染最常見(jiàn)。20世紀(jì)80年代中期以后報(bào)道的病例大多數(shù)無(wú)馬等動(dòng)物接觸史，感染人群以晚期艾滋病患者為主，而且以肺部感染、敗血癥多見(jiàn)。馬紅球菌病是幼齡馬駒常見(jiàn)疾病之一，該菌可在疫區(qū)土壤中分離到。染病馬駒多1～6個(gè)月齡，大多數(shù)馬駒4～12周齡時(shí)顯示臨床癥狀。一般呈慢性或亞急性支氣管肺炎，有時(shí)伴發(fā)盲結(jié)腸和腸系膜淋巴結(jié)潰瘍。馬紅球菌偶然也可以從被隔離的豬和山羊頸部淋巴結(jié)中分離出來(lái)，在肝部形成肉芽腫并引起年輕動(dòng)物消瘦和死亡［2］。馬紅球菌病傳染在除馬駒、豬和山羊外，其他物種中很少見(jiàn)，一般認(rèn)為可致人類的機(jī)會(huì)性感染，特別是免疫功能低下者，如器官移植、惡性腫瘤、結(jié)核病患者等等，但較少見(jiàn)。國(guó)內(nèi)報(bào)道的病例大多為人類免疫缺陷病毒(HIV)抗體陰性，病變涉及多個(gè)組織器官，引起慢性或亞急性炎癥改變。其標(biāo)本來(lái)源主要是血液、膿性分泌物、痰液、胸腔積液、尿液等，其中血培養(yǎng)陽(yáng)性率較高。

馬紅球菌病的臨床表現(xiàn)

患者可有單一組織或多系統(tǒng)受累，且感染易復(fù)發(fā)。

有10%～15%感染者發(fā)生在無(wú)免疫缺陷的人群中。這類人群的感染既可僅局限于皮膚傷口，也可出現(xiàn)致死性系統(tǒng)感染。這類感染的人群中47%是局部感染，40%是肺部感染，肺外感染包括眼內(nèi)炎、外傷性腦膜炎、淋巴結(jié)炎、淋巴管炎、膿毒性關(guān)節(jié)炎、骨髓炎等。

有10%的馬紅球菌感染發(fā)生在接受接受移植手術(shù)的患者中，是接受免疫抑制劑治療的一項(xiàng)晚期并發(fā)癥，其預(yù)后則界于常人群和艾滋病感染之間。

約2/3的馬紅球菌感染者是艾滋病陽(yáng)性患者。其發(fā)生馬紅球菌菌血癥及肺外表現(xiàn)的比例較無(wú)艾滋病感染高。

馬紅球菌感染最普通的病變是慢性化膿性支氣管肺炎和廣泛性肺部膿腫。臨床上常見(jiàn)發(fā)熱、咳嗽、呼吸困難及胸痛。病程經(jīng)過(guò)潛隱，常表現(xiàn)為慢性、進(jìn)行性肺炎性肉芽腫，肺的浸潤(rùn)性病變常發(fā)展成胸片可見(jiàn)的空洞性損害。約1/3有馬紅球菌引起敗血癥、肺炎、扁桃體炎、前列腺炎、腦膜炎、尿道炎、腎炎、心內(nèi)膜炎等等，其中最多的是敗血癥［3］，其次是局部的化膿性感染、肺炎?；颊咧饕R床癥狀有發(fā)熱，以中、高熱為主，體溫38～39℃，熱型不規(guī)則，可伴有畏寒、乏力、頭痛及全身肌肉酸痛不適、全身充血性皮疹等癥狀。其他還有咳嗽、局部紅腫疼痛、腹痛、胸痛、消瘦、尿頻尿痛等。體格檢查可有感染局部的紅腫、壓痛，肺部聽(tīng)診呼吸音減弱，可聞及濕性音。

馬紅球菌病的診斷

雖然作為人類機(jī)會(huì)感染的馬紅球菌病已經(jīng)引起了人們的關(guān)注，但是大多數(shù)此病患者仍然難以得到及時(shí)診斷。影響及時(shí)診斷的因素包括起病隱匿，其臨床表現(xiàn)與分枝桿菌、真菌、放線菌感染相似，以及實(shí)驗(yàn)室對(duì)該菌認(rèn)識(shí)仍然不足。根據(jù)馬紅球菌形態(tài)的多形性、部分抗酸性、部分抗酸性、支氣管標(biāo)本中的特征性的組織病理形態(tài)有助于診斷。確診需從患者痰液、肺部活檢其他病理組織等標(biāo)本中分離培養(yǎng)出馬紅球菌，有時(shí)候需要多次留標(biāo)本或延長(zhǎng)時(shí)間才能出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果［4］。

馬紅球菌病的治療

大多數(shù)抗生素對(duì)馬紅球菌有抗菌作用，但其敏感性差別很大，不同的地區(qū)有不同的耐藥菌譜［5］。所有分離出的馬紅球菌均應(yīng)進(jìn)行體外藥敏試驗(yàn)。

人類馬紅球菌病的治療根據(jù)藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果選用敏感的抗生素。對(duì)馬紅球菌感染，可選擇的敏感藥物有環(huán)丙沙星、氧氟沙星、頭孢三嗪、氯霉素和利福平等抗生素，聯(lián)合抗菌藥物治療可以產(chǎn)生協(xié)同作用［6］。目前，國(guó)內(nèi)報(bào)道的病例多為散發(fā)，涉及多個(gè)系統(tǒng)的疾病，經(jīng)使用敏感抗生素后都能治愈，無(wú)馬紅球菌相關(guān)死亡病例。體表部位的膿腫還可以采取局部換藥的方法促進(jìn)膿液的吸收［7］。至于療程，應(yīng)根據(jù)感染部位的不同和病程長(zhǎng)短而異，馬紅球菌敗血癥者，血培養(yǎng)陰性后即可停止抗菌治療。從報(bào)道的病例看，合并HIV感染，宜長(zhǎng)療程、聯(lián)合用藥，至少用藥90天以上，并盡早進(jìn)行高效抗反轉(zhuǎn)錄病毒治療［8］。對(duì)于多系統(tǒng)受累的免疫缺陷患者至少需要6個(gè)月的療程［9］。艾滋病合并馬紅球菌感染，宜足量長(zhǎng)療程使用敏感抗生素，并及早進(jìn)行抗病毒治療，這對(duì)提高治愈率、降低病死率有重要意義。

馬紅球菌病的預(yù)防

因?yàn)轳R紅球菌感染畢竟是罕見(jiàn)的，而且沒(méi)有數(shù)據(jù)能證明對(duì)其一級(jí)預(yù)防是有效的，所以一般不推薦對(duì)其進(jìn)行一級(jí)預(yù)防。某些研究者認(rèn)為對(duì)于HIV感染的患者，大環(huán)內(nèi)酯類或許有利于馬紅球菌感染的預(yù)防。免疫缺陷的患者應(yīng)避免接觸畜養(yǎng)動(dòng)物。鑒于對(duì)馬紅球菌傳播途徑尚缺乏了解，尤其有院內(nèi)感染報(bào)道的考慮，一些研究者主張應(yīng)隔離就醫(yī)的馬紅球菌肺炎患者，以避免發(fā)生院內(nèi)感染［10］。

總之，馬紅球菌是一種機(jī)會(huì)致病菌，它在免疫缺陷人群的發(fā)病率和病死率中占據(jù)重要地位。隨著近來(lái)對(duì)馬紅球菌感染認(rèn)識(shí)的增強(qiáng)，診斷的準(zhǔn)確性、及時(shí)性和療效均有所提高。但是，在它的感染途徑、發(fā)病機(jī)制尚未清楚，有待積累資料及動(dòng)物試驗(yàn)作進(jìn)一步探討［11］。

參考文獻(xiàn)

1 李艷,彭少華,樊秀華,等.23株馬紅球菌的生物學(xué)性狀及藥敏分析［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2000,10(3):232-233.

2 陳士恩,馬省強(qiáng).馬紅球菌感染的致病機(jī)理與預(yù)防［J］.西北民族學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2001,22(41):44-48.

3 楊華強(qiáng),張榮環(huán).馬棒狀桿菌敗血癥1例分析［J］.中國(guó)誤診學(xué)雜志,20O7,7(3):641-642.

4 威潤(rùn)鵬.馬紅球菌引起的急性心內(nèi)膜炎1例［J］.臨床和檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2006,5(1O):1481.

5 李艷,彭少華,樊秀華,等.23株馬紅球菌的生物學(xué)性狀及藥敏分析［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2000,10(3):232.

6 吳世木,馮嘉琳.從一膽道感染患者膽汁中分離出馬紅球菌［J］.上海醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,1999,14(3):161.

7 莉芬,毛菊秀,潘萬(wàn)俊.腹股溝淋巴結(jié)感染膿液中分離出馬紅球菌1例［J］.臨床檢驗(yàn)雜志,2007,25(4):272.

8 鄧萬(wàn)俊.HIV感染者繼發(fā)馬紅球菌感染的預(yù)后及臨床評(píng)價(jià)［J］.國(guó)外醫(yī)學(xué)?抗生素分冊(cè),2004,25(3):143-144.

篇7

1 醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的進(jìn)展

1.1 分子生物學(xué)技術(shù)的應(yīng)用:分子生物學(xué)的進(jìn)展給檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)帶來(lái)了巨大的變化，使得檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)也從細(xì)胞水平進(jìn)入了分子水平。將分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用到臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)，對(duì)疾病診斷深入到基因水平，稱為基因診斷?；蛟\斷技術(shù)主要包括核酸分子雜交技術(shù)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)、基因多態(tài)性分析技術(shù)、單鏈構(gòu)象多態(tài)性(SSCP)分析技術(shù)、熒光原位雜交染色體分析(FISH)技術(shù)、波譜核型分析(SKY) 技術(shù)以及蛋白質(zhì)組技術(shù)等。

1.2 生物芯片技術(shù):基因芯片的概念現(xiàn)已泛化到生物芯片(biochip)、微陣列(micr oar ray)、DNA 芯片(DNA chip)，甚至蛋白芯片。基因芯片集成了探針固相原位合成技術(shù)、照相平板印刷技術(shù)、高分子合成技術(shù)、精密控制技術(shù)和激光共聚焦顯微技術(shù)，使得合成、固定高密度的數(shù)以萬(wàn)計(jì)的探針?lè)肿右约皩?duì)雜交信號(hào)進(jìn)行實(shí)時(shí)、靈敏、準(zhǔn)確的檢測(cè)分析變得切實(shí)可行。

1.3 流式細(xì)胞儀的應(yīng)用:流式細(xì)胞儀(FCM) 有別于普通細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的方面在于它不僅能夠進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和簡(jiǎn)單的三分群或五分群，而且能夠?qū)?xì)胞亞型進(jìn)行檢測(cè)。臨床上，F(xiàn)CM 主要應(yīng)用于免疫學(xué)和血液病學(xué)方面。它克服了傳統(tǒng)免疫技術(shù)難以準(zhǔn)確定量的不足，可應(yīng)用于外周血T 淋巴細(xì)胞亞群的測(cè)定，對(duì)器官移植后的排斥反應(yīng)進(jìn)行監(jiān)測(cè)；用于肺泡灌洗液中T 淋巴細(xì)胞亞群的測(cè)定， 能夠快速、準(zhǔn)確的測(cè)定細(xì)胞表面抗原的表達(dá)，為多種肺部疾病的診斷和發(fā)病機(jī)制提供重要信息。FCM 還可同時(shí)檢測(cè)T 細(xì)胞總數(shù)、Th 細(xì)胞和Ts 細(xì)胞，結(jié)果準(zhǔn)確、報(bào)告迅速，國(guó)外已用來(lái)進(jìn)行HIV 的常規(guī)檢測(cè)。FCM 在血液病方面主要是對(duì)白血病進(jìn)行分型，可以克服傳統(tǒng)免疫熒光鏡檢法中人為因素的干擾和細(xì)胞計(jì)數(shù)少等造成的誤差，使之更為快速和精確。FCM 還可進(jìn)行淋巴瘤的免疫分型、白血病微小殘留病變和化療效果監(jiān)測(cè)、骨髓移植和干細(xì)胞移植的監(jiān)測(cè)等。用FCM 檢測(cè)活化血小板表面受體是近來(lái)血栓研究的一項(xiàng)重要技術(shù)。

1.4 發(fā)光免疫分析技術(shù):臨床上，發(fā)光免疫分析技術(shù)主要應(yīng)用于甲狀腺疾病相關(guān)免疫檢測(cè)、生殖內(nèi)分泌激素檢測(cè)、心肌蛋白的檢測(cè)和貧血指標(biāo)的檢測(cè)等。該技術(shù)以其靈敏度高(可達(dá)10- 18mo l/ L)、檢測(cè)速度快、操作簡(jiǎn)便、所使用試劑對(duì)人體無(wú)危害的優(yōu)點(diǎn)，成為非放射性免疫分析技術(shù)中最具有發(fā)展前景的方法之一。

1.5 現(xiàn)場(chǎng)即時(shí)檢驗(yàn)(point o f care testing， POCT):隨著急救醫(yī)學(xué)的發(fā)展，在急診科對(duì)危重患者的救治中快速檢驗(yàn)很有必要。這種需求刺激了相關(guān)科學(xué)和技術(shù)的進(jìn)步，給予了現(xiàn)場(chǎng)快速檢驗(yàn)的新生。

1.6 細(xì)菌耐藥檢測(cè):由于抗生素的普遍使用，臨床病原菌對(duì)抗生素的耐藥情況越來(lái)越嚴(yán)重，并出現(xiàn)了ESBL、MRSA 等廣譜耐藥菌。因此，盡早選擇敏感的抗生素對(duì)控制感染和節(jié)約醫(yī)療成本至關(guān)重要。臨床微生物室不僅需要分離鑒定感染標(biāo)本中的病原菌，而且應(yīng)該進(jìn)行藥物敏感實(shí)驗(yàn)，為臨床醫(yī)生選擇抗生素提供依據(jù)。

1.7 自動(dòng)散射比濁分析的應(yīng)用:散射比濁分析儀主要檢測(cè)的是血漿、體液中的特定蛋白系列，包括免疫球蛋白系列、補(bǔ)體系統(tǒng)、急性時(shí)相反應(yīng)蛋白系列、炎性反應(yīng)蛋白系列、載脂蛋白系列、尿微量蛋白系列和小分子藥物等。這些蛋白成分的檢測(cè)，可為臨床提供有效的病理生理指標(biāo)，作為臨床診斷、判斷治療效果和分析預(yù)后的依據(jù)。

2 醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的臨床應(yīng)用

臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)和試驗(yàn)數(shù)據(jù)主要用于以下幾個(gè)方面: ①揭示疾病的基本原因和機(jī)制，如動(dòng)脈粥樣硬化，糖尿病及代謝性疾病等；②根據(jù)發(fā)病機(jī)制，建立合理治療，如針對(duì)苯丙酮尿癥患者給予低苯丙氨酸飲食；診斷特異性疾病，如利用肌紅蛋白、肌鈣蛋白診斷心肌梗死； ③為某些疾病的早期診斷提供篩選試驗(yàn)，如測(cè)定血中甲狀腺素和促甲狀腺素用以診斷新生兒先天性甲狀腺機(jī)能減退癥；④監(jiān)測(cè)疾病的病情好轉(zhuǎn)、惡化、緩解或復(fù)發(fā)等，如利用肝功能試驗(yàn)對(duì)肝臟疾患進(jìn)行診斷和治療監(jiān)測(cè)；⑤治療藥物監(jiān)測(cè)。即根據(jù)血液以及其他體液中的藥物濃度，調(diào)整劑量，保證藥物治療的有效性和安全性；⑥輔助評(píng)價(jià)治療效果，如測(cè)定血中癌胚抗原含量監(jiān)測(cè)結(jié)腸癌的治療效果；⑦遺傳病產(chǎn)前診斷，降低出生缺陷病的發(fā)病率。

臨床微生物學(xué)是檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的亞專業(yè)之一，其綜合了臨床醫(yī)學(xué)、病原生物學(xué)和免疫學(xué)、臨床抗生素學(xué)和醫(yī)學(xué)流行病學(xué)等幾方面的知識(shí)和技能，對(duì)感染性疾病進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的診斷，密切結(jié)合臨床提出及時(shí)有效的治療方案，防止微生物產(chǎn)生耐藥性和醫(yī)院內(nèi)感染的發(fā)生。

綜上所述，醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)在臨床醫(yī)學(xué)中有著不可替代的作用。①醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的目的就是研究人體血液、體液、分泌物和排泄物中的致病因子，通過(guò)檢測(cè)這些致病因子的量和活性的變化而推斷疾病的發(fā)生發(fā)展來(lái)輔助臨床醫(yī)師準(zhǔn)確判斷疾病。②醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的結(jié)果是支持診斷、鑒別診斷，甚至是確診的主要依據(jù)，臨床醫(yī)生診斷治療疾病和判斷預(yù)后的途徑就是熟知檢驗(yàn)知識(shí)。

3 總結(jié)

檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展，不僅是循證醫(yī)學(xué)的必然要求，使醫(yī)療行為更為科學(xué)和經(jīng)濟(jì)，也將可能為前瞻性的預(yù)防措施的實(shí)施提供依據(jù)。隨著新的儀器及方法的擴(kuò)展，檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)在臨床生化、微生物學(xué)、血液學(xué)及免疫學(xué)等多個(gè)分支出現(xiàn)了一些新的檢驗(yàn)項(xiàng)目與技術(shù)，使針對(duì)患者的臨床治療更為合理和快速。

醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)在臨床醫(yī)學(xué)中有著不可替代的作用。①醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的目的就是研究人體血液、體液、分泌物和排泄物中的致病因子，通過(guò)檢測(cè)這些致病因子的量和活性的變化而推斷疾病的發(fā)生發(fā)展來(lái)輔助臨床醫(yī)師準(zhǔn)確判斷疾病。②醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的結(jié)果是支持診斷、鑒別診斷，甚至是確診的主要依據(jù)，臨床醫(yī)生診斷治療疾病和判斷預(yù)后的途徑就是熟知檢驗(yàn)知識(shí)。

篇8

1 RNAi的發(fā)現(xiàn)史

早在1990年的轉(zhuǎn)基因植物研究中，人們發(fā)現(xiàn)將全長(zhǎng)或部分基因?qū)胫参锛?xì)胞后會(huì)引發(fā)某些內(nèi)源基因不表達(dá)，但這些基因的轉(zhuǎn)錄并無(wú)影響，當(dāng)時(shí)將這種現(xiàn)象稱為基因轉(zhuǎn)錄后沉默(posttranscriptional gene silencing，PTGS)。1996年科研人員首次在線蟲(chóng)中發(fā)現(xiàn)dsRNA能夠?qū)е禄虺聊?，因此又將該現(xiàn)象命名為基因表達(dá)的阻抑作用(quelling)[2]。當(dāng)年康乃爾大學(xué)的研究人員Guo和Kemphues為探討基因功能，想利用反義鏈RNA來(lái)特異性地阻斷par-1基因的表達(dá)，然后設(shè)立了對(duì)照組實(shí)驗(yàn)以期正義鏈RNA能使目標(biāo)基因的表達(dá)量增加。但結(jié)果卻顯示二者都同樣的阻斷了par-1基因的表達(dá)。這個(gè)現(xiàn)象直到3年后才被解開(kāi)-華盛頓卡耐基研究院的Andrew Fire和馬薩諸塞大學(xué)癌癥中心的Craig Mello通過(guò)大量的實(shí)驗(yàn)得知，無(wú)論是單純的反義鏈還是正義鏈RNA都不能阻斷基因的表達(dá)，而起阻礙作用的是體外轉(zhuǎn)錄的RNA樣品中混有的微量dsRNA。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，純化后的單鏈RNA對(duì)基因表達(dá)的抑制作用是很微弱的，而dsRNA正好相反，因此他們將dsRNA能引發(fā)相應(yīng)基因表達(dá)阻斷的現(xiàn)象定義為RNAi。

2 RNAi在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用

2.1治療病毒性疾病

病毒性疾病的防治始終困擾著醫(yī)學(xué)工作者，并給人類的健康帶來(lái)巨大危害。由于RNAi能從源頭有效地抑制病毒抗原基因的表達(dá)，因此在病毒性防治方面較疫苗防治、藥物治療更優(yōu)越，為傳染性疾病的防治帶來(lái)希望。近些年來(lái)，RNAi技術(shù)在多種病毒性疾病的防控研究上取得了一定的進(jìn)展。

艾滋病又叫“獲得性免疫缺陷綜合征”（AIDS）是人體感染了人類免疫缺陷病毒（HIV）所導(dǎo)致的傳染病。MIT的Novina最早利用RNAi來(lái)對(duì)付HIV，開(kāi)啟了利用RNAi治療病毒性疾病的先河。研究發(fā)現(xiàn)，在慢病毒載體中加入抗HIV ShRNA（anti-HIV ShRNA）、抗CCR5核酶（anti-CCR5 ribozyme）和核仁內(nèi)反式激活反應(yīng)元件類似物（uncleolar-localizing TAR decoy）基因的串聯(lián)組合，可以長(zhǎng)時(shí)間的抑制HIV。證明了RNAi具有治療艾滋病的功能[3]。

乙型肝炎和丙型肝炎是經(jīng)血液傳播的危害性嚴(yán)重的病毒性傳染病，分別由乙型肝炎病毒（HBV）和丙型肝炎病毒（HCV）感染而起。自2003年以后，應(yīng)用RNAi治療乙肝、丙肝的研究也逐漸增多。2005年Sirna治療學(xué)公司（Sirna Therapeutics）宣布實(shí)現(xiàn)了RNAi應(yīng)用于治療中的重大突破，成功抑制了乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）在人體內(nèi)的表達(dá)。研究發(fā)現(xiàn)，應(yīng)用短發(fā)夾RNA載體可以抑制哺乳動(dòng)物肝臟細(xì)胞中HBV的復(fù)制起始，同時(shí)siRNA也可以有效抑制HBV的復(fù)制。根據(jù)這種研究思路，人們利用RNAi抑制了HCV在人體內(nèi)的復(fù)制。這些研究都證明了RNAi在抗病毒方面的優(yōu)勢(shì)作用[4]。

此外，Nobel醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)獲得者Phillip Sharp，已成功在2005年開(kāi)發(fā)出用來(lái)治療呼吸道合胞病毒、流行性感冒的RNAi藥物。同期中國(guó)旅美生物醫(yī)學(xué)博士陸陽(yáng)和Intradigm公司分別在《Nature》發(fā)表文章闡述siRNA劑對(duì)恒河猴SARS冠狀病毒（SCV）呼吸道感染能起到預(yù)防和治療作用。RNAi目前已經(jīng)成為治療病毒性疾病的一種有效手段，但在穩(wěn)定性、安全性等問(wèn)題上還有待深入研究。

2.2治療遺傳性疾病

隨著RNAi現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)以及對(duì)它的分子生物學(xué)機(jī)制的深入探討，利用RNAi解決人類遺傳性疾病已經(jīng)不再遙遠(yuǎn)。2002年，美國(guó)和日本的研究人員Carthew R W、Ishizuka A等人幾乎同時(shí)發(fā)現(xiàn)RNAi與脆性X染色體綜合征的關(guān)系，這預(yù)示機(jī)體內(nèi)RNAi機(jī)制缺失會(huì)導(dǎo)致人類遺傳性疾病[5， 6]。此后在對(duì)抗人類遺傳性疾病研究中，RNAi成為廣泛采用的手段。人們不久發(fā)現(xiàn)，RNAi在治療人類神經(jīng)系統(tǒng)疾病方面有優(yōu)于其他治療方法的特點(diǎn)。其中神經(jīng)變性疾病是由于單個(gè)基因顯性突變而引起的遺傳性疾病。目前已有許多神經(jīng)變性疾病如亨廷頓病(Huntington’s disease)、脊髓延髓肌肉萎縮癥、帕金森病、肌萎縮性（脊髓）側(cè)索硬化（ALS）、阿爾茨海默癥等都可以通過(guò)RNAi來(lái)抑制突變基因表達(dá)。

可以看出RNAi在遺傳性疾病治療方面擁有巨大的潛力，但如何透過(guò)血液將siRNA送達(dá)效用部位還是急需解決的一個(gè)難題，我們堅(jiān)信在醫(yī)學(xué)科研人員的努力下，一項(xiàng)成熟的基于RNAi的治療技術(shù)將用于臨床實(shí)踐。

2.3治療腫瘤疾病

腫瘤疾病的本質(zhì)屬于“基因病”，惡性腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移是臨床上絕大多數(shù)腫瘤患者的致死原因，腫瘤發(fā)生過(guò)程主要是原癌基因、生長(zhǎng)因子異常高表達(dá)和腫瘤抑制因子突變的結(jié)果，故從基因水平解決腫瘤疾病是最佳的。siRNA能夠高效、特異地抑制原癌基因及癌相關(guān)基因的表達(dá)，目前已成為臨床上腫瘤防治研究的有力工具。但從當(dāng)前的研究狀況看，要利用RNAi策略解決腫瘤治療問(wèn)題，首先要解決靶基因的選擇及siRNA向體內(nèi)的定向輸送。采用逆轉(zhuǎn)錄病毒系統(tǒng)可以有效地將siRNA插入腫瘤細(xì)胞基因組中并長(zhǎng)期存在，解決了siRNA作用時(shí)間短，實(shí)際操作困難等缺點(diǎn)。Wenping Li[7]等人利用腺病毒介導(dǎo)的siRNA轉(zhuǎn)染使PBR mRNA下降50%，細(xì)胞分裂增殖停止，從而抑制腫瘤的生長(zhǎng)，故PBR可作為治療人乳腺癌潛在的靶標(biāo)。Menendez等人將與靶基因FAS mRNA序列相對(duì)應(yīng)的siRNA轉(zhuǎn)染到培養(yǎng)的人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中72h后，發(fā)現(xiàn)FAS基因表達(dá)下降90%，從而成功的抑制了子宮癌細(xì)胞的生長(zhǎng)[8]。

目前，利用RNAi對(duì)腫瘤進(jìn)行研究與治療還存在很多問(wèn)題，是否所有腫瘤細(xì)胞中RNAi現(xiàn)象都存在，是否某些腫瘤細(xì)胞中的RNAi現(xiàn)象是被抵抗的，是否人體內(nèi)腫瘤細(xì)胞的RNAi現(xiàn)象和動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)中呈現(xiàn)的效果是相符的，人類攻克腫瘤問(wèn)題還需很長(zhǎng)的歷程，無(wú)疑RNAi為腫瘤的治療提供新的思路和策略。

3 RNAi的前景展望

RNAi作為一種代替基因敲除的遺傳工具，可以有效地對(duì)基因進(jìn)行功能評(píng)價(jià)。該技術(shù)正改變著功能基因組學(xué)的研究步伐?！犊茖W(xué)》雜志和美國(guó)科學(xué)促進(jìn)會(huì)已將RNAi技術(shù)評(píng)選為2002年十大重大科學(xué)成就之首。由于RNAi技術(shù)的日益發(fā)展，它已經(jīng)迅速地從實(shí)驗(yàn)室研究邁向了臨床應(yīng)用。目前，幾種真正意義上的RNA干擾藥物已經(jīng)進(jìn)入了臨床實(shí)驗(yàn)階段。相對(duì)于近些年大力發(fā)展的基因治療、反義核酸技術(shù)、生物芯片等新興生物技術(shù)來(lái)說(shuō)，RNAi無(wú)疑將會(huì)給醫(yī)學(xué)界帶來(lái)更具潛力的突破和發(fā)展。但值得人們注意的是RNAi在哺乳動(dòng)物中的研究還具有一定的限制性，比如在哺乳動(dòng)物的某些細(xì)胞中RNAi作用并不顯著，特別像一些神經(jīng)細(xì)胞。而且通過(guò)運(yùn)載體將dsRNA轉(zhuǎn)入人體進(jìn)行基因治療還是一個(gè)很大的難點(diǎn)?？上驳氖抢孟俨《咀鬟\(yùn)載體的實(shí)驗(yàn)?zāi)壳耙呀?jīng)取得成功，人們還在尋求一種更加穩(wěn)定和安全的運(yùn)載體[9]。二十一世紀(jì)是基因的時(shí)代，更是生命科學(xué)的時(shí)代，RNAi的發(fā)現(xiàn)無(wú)疑是這一時(shí)代醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的一個(gè)嶄新突破，它為解決人類疾病開(kāi)辟新的篇章。

參 考 文 獻(xiàn)

[1]Jorgensen RA，Culster PD，English J.etal.Chalcone synthase cosupp-ression phenotypes in petunia flowers: comparison antisense constructs and single-copy vs. complex T-DNA sequences[J].Plant Mol Biol， 1996，31(5):957-970.

[2]FIRE A， XU S， MONTGOMERY M K，et al， Potent and specific genetic interference by double- standed RNA in Caenorhabditis elegans [J]. Nature， 1998， 39:806-811.

[3]Li MJ，Kim J，Li S，et al. Long-term inhibition of HIV-1 infection in primary hematopoietic cells by lentiviral vector delivery of a triple combination of anti-HIV shRNA， anti-CCR5 ribozemy ，and a nucleolar TAR decoy. MOLECULAR THERAPY， 2005， 12(5):900-907.

[4]McCaffrey AP，Nakai H，Pandey K， et al. Inhibition of hepatitis B virus replication by RNA interference. BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS， 2003， 309(2):482-483.

[5]Carthew RW. RNA interference: the fragile X syndrome connection[J]. Current Biology， 2002， 12(24):852-854.

[6]Ishizuka A， Siomi MC， Siomi H. A drosophila fratile X protein interacts with components of RNA and ribosomal proteins[J]. Genes & Development， 2002，16(19):2497-2508.

篇9

牙著色可分為外源性著色和內(nèi)源性著色。冷光美白和激光漂白技術(shù)是臨床上針對(duì)牙著色的主要治療方法。運(yùn)用的漂白劑主要有過(guò)氧化氫、過(guò)氧化脲和過(guò)硼酸鈉，它們最終主要是依靠過(guò)氧化氫來(lái)發(fā)揮漂白作用，它在光、熱、電離時(shí)分解的·OH或HOO·自由基可以切斷著色牙內(nèi)有機(jī)大分子中未飽和的二價(jià)鍵（著色分子鎖），將其氧化形成小分子物質(zhì)，達(dá)到脫色或者顏色變淺的目的。但是目前的這些美白方法治療時(shí)間長(zhǎng)、漂白效果較差、易復(fù)發(fā)［12］。近些年來(lái)，有些研究者將目光轉(zhuǎn)向了低溫等離子體技術(shù)。低溫等離子體中含有大量活性基團(tuán)和帶電粒子，為加速美白過(guò)程和提高美白質(zhì)量帶來(lái)了曙光。PengSun等［13］對(duì)大氣壓直流低溫等離子體的美白作用進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示短時(shí)間內(nèi)（10min或20min），等離子體可以促進(jìn)過(guò)氧化氫凝膠的美白效果。Lab色度系統(tǒng)對(duì)處理前后的牙齒進(jìn)行顏色測(cè)定和分析時(shí)，等離子體處理組E的改變是單純過(guò)氧化氫凝膠處理后的兩倍或三倍；同時(shí)，通過(guò)電子自旋共振檢測(cè)自由基，發(fā)現(xiàn)等離子體處理雙氧水后的·OH自由基峰值是單純雙氧水的兩倍，因此推斷低溫等離子體可以加速過(guò)氧化氫分解，生成更多的·OH自由基并發(fā)揮其氧化著色大分子的功能。HyunWooLee等［14］研究結(jié)果也顯示，低溫等離子體也可以引起牙齒表面的蛋白物質(zhì)的變性，使其與牙齒疏松連接或脫離，加速美白產(chǎn)生。PengSun等［13］檢測(cè)低溫等離子體處理時(shí)牙齒表面的溫度為37°C左右，并用驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)證明此溫度對(duì)美白無(wú)明顯影響。雖然，低溫等離子體和過(guò)氧化氫一起美白的治療時(shí)間短、漂白效果好，但是仍沒(méi)有脫離過(guò)氧化氫的環(huán)境。高濃度過(guò)氧化氫仍然有引起牙體硬組織微觀結(jié)構(gòu)上的改變，對(duì)成纖維細(xì)胞有毒性，引起細(xì)胞活性降低等副作用。因此，脫離過(guò)氧化氫，單純用低溫等離子體中的活性自由基進(jìn)行美白效果評(píng)價(jià)是下一步牙齒美白研究的重要方向。

3口腔生物材料的表面修飾

低溫等離子體表面處理具有效果顯著，成本低廉，無(wú)污染等諸多優(yōu)點(diǎn)，在高分子聚合物及其他材料的改性處理中取得了良好的效果。低溫等離子體的氣體溫度一般保持在在300～500K，壓力則為130～1340Pa，其對(duì)材料的表面修飾僅在于表面幾百納米的范圍，在不會(huì)改變材料的基本性能的基礎(chǔ)上，對(duì)材料的表面起到一個(gè)活化的作用，改變材料的濕潤(rùn)性，細(xì)胞相容性等等，使其生物活性發(fā)生變化。有學(xué)者［15］通過(guò)低溫等離子體對(duì)口腔陶瓷材料進(jìn)行作用，通過(guò)掃描電鏡、X光電子能譜測(cè)試儀、X射線衍射儀和體外成骨細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)材料類骨磷灰石的形成和表面生物活性進(jìn)行測(cè)定，發(fā)現(xiàn)低溫等離子體有利于材料表面類骨磷灰石的形成，并最終提高了陶瓷材料的生物活性。吳峻嶺等［16］將氧低溫等離子體作用于口腔非金屬樁核修復(fù)系統(tǒng)－纖維樁，觀察纖維樁－樹(shù)脂核之間粘結(jié)強(qiáng)度的變化，認(rèn)為纖維樁中的高分子聚合物基質(zhì)與導(dǎo)入系統(tǒng)的氧發(fā)生了化學(xué)反應(yīng)而產(chǎn)生含氧基團(tuán)，使表面分子鏈上產(chǎn)生極性，大大提高了其潤(rùn)濕性能，從而提高了纖維樁和核樹(shù)脂之間的粘結(jié)力。盧光等［17］對(duì)比了NH3、CO2和O2低溫等離子體表面修飾聚羥基丁酸戊酸脂材料的生物活性，應(yīng)用氣泡法對(duì)接觸角進(jìn)行測(cè)量，光電子能譜分析表面元素，熒光染色、電鏡和MTT法分析了接種細(xì)胞的增值情況，發(fā)現(xiàn)修飾后的膜在接觸角、細(xì)胞形態(tài)及細(xì)胞增殖狀況各方面性能得到明顯改善，證明了NH3、CO2和O2低溫等離子體在材料表面引入了活性基團(tuán)，有效地提高了材料的細(xì)胞相容性，為組織工程血管的表面修飾提供了一種有效的方法。在口腔醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，低溫等離子體被用來(lái)建立高分子聚合體表面濕潤(rùn)模型［18］和提高樹(shù)脂基托的濕潤(rùn)性及粘結(jié)性時(shí)［19］，均取得滿意效果。等離子體作用材料表面的機(jī)理非常復(fù)雜，處理效果易受多因素影響，如處理氣體的選擇，處理的時(shí)間，處理后樣品的后續(xù)處理等等，導(dǎo)致的最終結(jié)果大有差異，同時(shí)最終檢測(cè)方法未標(biāo)準(zhǔn)化，也是急需解決的問(wèn)題。定量化的檢測(cè)手段和明確反應(yīng)基團(tuán)的原理將是等離子體材料表面改性研究未來(lái)的重點(diǎn)。

4低溫等離子體消融

低溫等離子體消融術(shù)又稱冷融切技術(shù)（Coblation），通過(guò)強(qiáng)射頻電場(chǎng)使刀頭和組織間的電解液形成等離子體薄層，利用低溫等離子體薄層中的加速帶電粒子打斷組織的分子鍵，使靶組織以分子為單位解體，使目標(biāo)組織細(xì)胞直接氣化或變性、壞死、脫落。其工作時(shí)組織表面溫度一直保持在55℃以下，不灼傷周圍組織，恢復(fù)快；因系低溫下汽化，只作用于目標(biāo)組織的表層或黏膜下層細(xì)胞，保護(hù)黏膜且減輕疼痛，有微創(chuàng)、有效、高安全性的特點(diǎn)。自20世紀(jì)90年代末始將Coblation技術(shù)引入口腔領(lǐng)域，用于治療阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征（Obstruc－tivesleepapneahypopneasyndrome，OSAHS）。OSAHS是具有潛在危害的一種睡眠疾病，其發(fā)病原因是上氣道發(fā)生狹窄和阻塞，通常發(fā)生在鼻及鼻咽部、口咽部及舌根部等多個(gè)平面。傳統(tǒng)手術(shù)方法是懸雍垂腭咽成形術(shù)，但療效僅有40％左右。利用Coblation術(shù)可以局部消融鼻甲、軟腭、懸雍垂和舌根組織等多個(gè)平面，使得治療處組織發(fā)生凝固性壞死，然后瘢痕收縮使體積縮小，達(dá)到擴(kuò)大氣道的目的。Co－blation手術(shù)在治療OSAHS方面取得了良好的臨床效果，20世紀(jì)末其療效報(bào)道從46％～78％不等［20］。Powell等［21］1997年應(yīng)用Coblation開(kāi)展軟腭打孔減容手術(shù)治療OSAHS病人，多導(dǎo)睡眠監(jiān)測(cè)顯示平均最低氣道壓及平均睡眠效率明顯改善，74％患者生活質(zhì)量提高。隨后的研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，單純的軟腭打孔減容術(shù)對(duì)中、重度患者效果并不理想，而且阻塞原因、部位判斷不明確，手術(shù)方式單一、缺乏個(gè)體化方案等因素易影響手術(shù)療效。目前認(rèn)為，在明確阻塞平面后，嚴(yán)格掌握適應(yīng)證的情況下，采用多部位、多平面的Coblation治療［22］，顯示了其微創(chuàng)和一期手術(shù)中同時(shí)解決多平面阻塞的獨(dú)特優(yōu)點(diǎn)，結(jié)果明顯優(yōu)于單純打孔，為輕中度OSAHS患者首選外科治療方法，是重度OSAHS患者補(bǔ)充治療的有效方法。另外，Coblation也開(kāi)始應(yīng)用于血管畸形和口腔腫瘤的治療。傳統(tǒng)手術(shù)治療兒童舌淋巴管畸形，創(chuàng)傷較大，復(fù)發(fā)率高，切除過(guò)多影響到舌功能及發(fā)音。Coblation手術(shù)治療利用EVac70刀頭直接消融至舌黏膜下層，術(shù)后1d即能進(jìn)食，創(chuàng)面愈合快，隨訪1年未見(jiàn)復(fù)發(fā)，舌外形和功能均未受影響［23］。PsaltisA［24］把Coblation應(yīng)用于舌、口底、口咽、喉癌及下咽癌的治療，并與CO2激光切除作對(duì)比，認(rèn)為手術(shù)時(shí)間較短，出血小、碳化少，術(shù)后復(fù)發(fā)時(shí)間延長(zhǎng)，激光只能作直視下切割，Coblation可變換多角度，適用于T1～T3口腔、口咽部惡性腫瘤。但目前應(yīng)用于頭頸腫瘤的報(bào)道，特別是惡性腫瘤手術(shù)的病例數(shù)還不多，遠(yuǎn)期療效有待觀察。隨著設(shè)備研究的開(kāi)發(fā)完善，治療手段進(jìn)一步聯(lián)合應(yīng)用，低溫等離子體在外科消融治療中會(huì)得到更廣闊的前景。

5低溫等離子體抑制癌細(xì)胞

Fridman等［25］研究顯示FE－DBD可以引起黑色素瘤癌細(xì)胞的凋亡，通過(guò)一系列的復(fù)雜生物化學(xué)反應(yīng)使癌細(xì)胞在作用后幾小時(shí)到幾天后發(fā)生細(xì)胞死亡。細(xì)胞凋亡中大分子以可控的模式分解為小碎片，細(xì)胞降解的同時(shí)不會(huì)損害周圍的細(xì)胞，也不會(huì)引起感染的發(fā)生。黑色素瘤細(xì)胞在接受低溫等離子體作用后發(fā)生繼發(fā)的破壞和凋亡的這些結(jié)果，提示低溫等離子體在治療癌癥方面具有殺死癌細(xì)胞的潛力。如果可以利用它選擇性地標(biāo)記癌細(xì)胞，與正常細(xì)胞區(qū)分開(kāi)來(lái)，將會(huì)在治療癌癥中有重大意義。隨后，為了深一步研究低溫等離子體的抑癌機(jī)理，眾多學(xué)者紛紛進(jìn)行了相關(guān)研究工作。Lee等［26］認(rèn)為等離子體處理可以導(dǎo)致細(xì)胞從基底脫落，誘導(dǎo)黑素瘤細(xì)胞的死亡、抑制整合蛋白α2，4，以及細(xì)胞表面FAK的表達(dá)，并使得機(jī)動(dòng)蛋白纖維成為擴(kuò)散狀。Yan等［27］利用氣壓等離子體射流能有效地抑制癌細(xì)胞的增殖，等離子體處理后癌細(xì)胞的周期被抑制在G2／M期，且這部分細(xì)胞隨培養(yǎng)時(shí)間的增加會(huì)發(fā)生凋亡。Kim等［28］研究發(fā)現(xiàn)等離子體誘發(fā)癌細(xì)胞的凋亡并導(dǎo)致DNA破壞和Mitochondria的功能紊亂，活化了促進(jìn)細(xì)胞凋亡的蛋白質(zhì)，即細(xì)胞凋亡蛋白－3．且處理過(guò)后的細(xì)胞積累了gamma－H2AX（DNA雙鏈裂解的標(biāo)志）以及相應(yīng)地出現(xiàn)了p53腫瘤消除基因。Sensenig等［29］認(rèn)為低溫等離子體可以產(chǎn)生以上作用均是其中的活性氧集團(tuán)在發(fā)揮主導(dǎo)作用。

6低溫等離子體促進(jìn)凝血

創(chuàng)傷治療中凝血是一個(gè)非常重要的概念，近來(lái)新興的低溫等離子體技術(shù)并不是通過(guò)熱效應(yīng)來(lái)達(dá)到凝血的目的，它是在不損傷周圍組織的前提下通過(guò)調(diào)節(jié)特定凝血機(jī)制來(lái)達(dá)到凝血作用。在體外凝血試驗(yàn)中，F(xiàn)E－DBD可明顯加速凝血［30］。健康捐贈(zèng)者的血液樣本置于不銹鋼器皿表面，經(jīng)過(guò)大約15min凝固，而對(duì)血液樣本進(jìn)行15s的低溫等離子體處理后，凝固時(shí)間縮短為1min以下。FE－DBD用于體外器官的凝血實(shí)驗(yàn)也取得了類似的效果。當(dāng)它作用于人類脾臟切口處30s后，結(jié)果發(fā)現(xiàn)切口處血液凝固。檢測(cè)處理區(qū)域的溫度顯示仍然保持在室溫（甚至用FE－DBD處理5min），并且傷口處仍保持濕潤(rùn)。在體內(nèi)凝血試驗(yàn)中，等離子體同樣有效。Fridman等［31］在SKH1小鼠身上的隱靜脈和尾部靜脈切口處進(jìn)行15s的FE－DBD作用后均可見(jiàn)明顯凝血效果。低溫等離子體促進(jìn)凝血的具體生物化學(xué)通路仍不清楚，研究者從已經(jīng)觀察到的事實(shí)推測(cè)了許多可能的機(jī)理［30］。首先，低溫等離子體通過(guò)觸發(fā)自然的凝血機(jī)制而不是熱效能來(lái)發(fā)揮作用；其次，實(shí)驗(yàn)中觀察到鈣離子的釋放和血液PH值發(fā)生變化，這些都會(huì)引起凝血的發(fā)生。最后，低溫等離子體對(duì)血液蛋白選擇性作用并能夠促進(jìn)血小板活化、纖維蛋白絲生成，啟動(dòng)凝血進(jìn)程。凝血塊形態(tài)學(xué)變化通過(guò)掃描電鏡進(jìn)一步得到證實(shí)，即等離子體并不是通過(guò)“cook”血液，而是啟動(dòng)和促進(jìn)了正常的凝血機(jī)制發(fā)揮作用。凝血一連串反應(yīng)的第一步為血小板的活化和聚集，隨后纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白絲。

7其他應(yīng)用

Stoffels等［32］發(fā)明了一種可以手持的針形低溫等離子體發(fā)生裝置，包括直徑0．3mm的針頭，直徑0．8mm甲基丙烯酸甲酯的導(dǎo)管，長(zhǎng)約10cm。在裝置的尾部以13．56MHz的頻率產(chǎn)生低溫等離子體，用來(lái)治療齲病時(shí)發(fā)現(xiàn)它可以有效滅活變形鏈球菌等致齲菌；并初步研究了它對(duì)口腔內(nèi)真核細(xì)胞如成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞等作用的生物化學(xué)原理。等離子體治療也已經(jīng)逐步應(yīng)用于慢性齦炎、口腔黏膜局部創(chuàng)傷、潰瘍、慢性感染并發(fā)癥、種植體周圍炎和其他一些軟組織黏膜類疾病。

篇10

研究進(jìn)展

腦鈉肽或B型利鈉肽（brain/B type of natriuretic peptide，BNP)，是1988年由Sudoh等首先從豬腦內(nèi)分離出來(lái)的一種心血管肽類激素。它是利鈉肽家族中的一員，BNP主要由心室分泌，是反映左心室功能的敏感指標(biāo)。目前關(guān)于BNP的臨床研究主要集中在BNP與心功能不全和急性冠狀動(dòng)脈綜合征的診斷、治療、預(yù)后等方面，而在法醫(yī)病理學(xué)方面的研究主要是死因分析、死亡方式的推斷以明確傷病關(guān)系等?，F(xiàn)就目前的研究進(jìn)展和應(yīng)用作一綜述。

1 BNP生物學(xué)特性

人BNP基因位于人類染色體1p36.2，基因全長(zhǎng)1922堿基對(duì)，含有3個(gè)外顯子和2個(gè)內(nèi)含子，其mRNA由692堿基對(duì)組成，編碼具有134個(gè)氨基酸的BNP前體蛋白原，然后進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)修飾裂解產(chǎn)生108個(gè)氨基酸的BNP前體(proBNP)和26氨基酸的信號(hào)肽，proBNP再裂解為76個(gè)氨基酸的N末端BNP（NT-porBNP）和32個(gè)氨基酸的BNP并釋放到細(xì)胞外。當(dāng)心室肌細(xì)胞受到牽張或室壁張力增大時(shí)，BNP、NT-porBNP以1 ∶1的比例釋放入血，NT-ProBNP的半衰期為60～120 min，無(wú)內(nèi)分泌活性，主要由腎臟清除；BNP的半衰期為20 min，主要在肺和腎內(nèi)降解。左心室是BNP合成分泌的主要場(chǎng)所，但右心室和心心房亦可合成分泌BNP。

BNP通過(guò)與其受體結(jié)合而發(fā)揮生物學(xué)作用。目前發(fā)現(xiàn)有A、B、C 3種受體[1]，其廣泛分布于人體心臟、血管內(nèi)皮、血管平滑肌細(xì)胞、腎臟、腎上腺和中樞神經(jīng)系統(tǒng)等組織。3種受體是各種BNP的共同受體，但其親和力各不相同。BNP的生物學(xué)作用有：（1）增加腎小球?yàn)V過(guò)率，抑制Na+重吸收而利鈉、利尿;（2）松弛血管平滑肌，擴(kuò)張動(dòng)、靜脈而降低血壓，及減輕心臟前后負(fù)荷;（3）抑制交感神經(jīng)系統(tǒng)活性;（4）拮抗腎素、血管緊張素、醛固酮系統(tǒng);（5）最近研究表明BNP尚可直接松馳心肌，抑制心肌纖維化及血管平滑肌增生，抗冠脈痙攣等作用。

2 影響血槳BNP濃度的因素和疾病

血漿BNP濃度受年齡、性別、心率、腎功能等因素影響[2]。健康人群女性BNP濃度較男性高25 %，服用激素替代治療的絕經(jīng)期后婦女BNP濃度較高，表明雌激素對(duì)其有影響。BNP濃度與年齡呈正相關(guān)，但亦有不同的報(bào)告。健康人群心率每分鐘增加10次，NT-proBNP下降15 %，BNP下降9 %，因此認(rèn)為BNP合成、分泌主要在舒張期或依賴舒張期充盈壓。在健康人，左室射血分?jǐn)?shù)越高，BNP濃度越高，而左室收縮功能不全和心力衰竭(HF)患者恰恰相反。

盡管BNP主要由心臟分泌，但血漿BNP濃度可受其它系統(tǒng)疾病和藥物的影響。能引起B(yǎng)NP濃度升高的疾病有：肺部疾病，如肺心病或合并有右室限制的肺部疾病，尤其是呼吸道疾病急性加重期及嚴(yán)重缺氧；高血壓及肺動(dòng)脈高壓，尤其是高血壓并左室肥厚；心臟結(jié)構(gòu)異常，如主動(dòng)脈瓣狹窄、二尖瓣狹窄、肥厚性心肌病；內(nèi)分泌及代謝疾病，如甲亢、庫(kù)欣綜合征(或外源性糖皮質(zhì)激素)、原發(fā)性醛固酮增多癥、Addison綜合征、糖尿??；其它如肝硬化及腹水、急性腎衰、副腫瘤綜合征、蛛網(wǎng)膜下腔出血、急性冠狀動(dòng)脈綜合征。β受體阻滯劑可輕微升高BNP濃度，而ACEI類藥物可降低BNP濃度。心功能衰竭患者經(jīng)積極治療(急性期靜脈用擴(kuò)血管藥物和利尿劑，盡早及長(zhǎng)期應(yīng)用ACEI類藥物和β受體阻滯劑)，BNP濃度降低。

3 BNP檢測(cè)方法

臨床中BNP濃度的檢測(cè)方法主要有放射免疫法分析（radioimmunoassay，RIA）和免疫放射分析法（immunoradiometric assay，IRMA）。此兩種方法測(cè)得血漿BNP的正常值范圍為0.5～30 pg/mL。新近應(yīng)用的美國(guó)博適床旁快速定量心力衰竭/心肌梗死診斷儀使用全血標(biāo)本，15 min顯示測(cè)量結(jié)果。推薦的心衰診斷界值為100 pg/mL。法醫(yī)病理學(xué)中除RIA、IRMA之外還應(yīng)用免疫螢光法、免疫組織化學(xué)方法、RT-qPCR等方法來(lái)測(cè)定心肌組織、體液中BNP及其基因。RT-qPCR是近年來(lái)應(yīng)用最廣泛的新興分子生物學(xué)技術(shù)，是核酸定量、半定量檢測(cè)中最準(zhǔn)確、靈敏、簡(jiǎn)單和快捷的方法之一。

4 BNP在臨床中的應(yīng)用

4.1 BNP與充血性心力衰竭

BNP在心力衰竭中的臨床應(yīng)用目前已經(jīng)較為成熟，它包括了以下幾個(gè)方面:（1）早期診斷:在充血性心力衰竭(CHF)患者中，在不考慮年齡、心力衰竭嚴(yán)重程度的評(píng)估分級(jí)(NYHA)、心功能損傷原因、左心室射血分?jǐn)?shù)等相關(guān)因素，高水平BNP/NT-proBNP和心血管疾病引起的死亡率上升密切相關(guān)。國(guó)內(nèi)小樣本臨床研究亦顯示出BNP診斷心力衰竭具有較高的敏感性和特異性[2]。在多因素分析中，使用BNP/NT-proBNP水平對(duì)死亡率進(jìn)行預(yù)測(cè)要比使用NYHA分級(jí)更為準(zhǔn)確[3]。（2）對(duì)心衰治療效果的評(píng)價(jià):實(shí)驗(yàn)表明，在治療有效的患者中，BNP/NT-proBNP水平開(kāi)始下降，在治療無(wú)效或是心功能進(jìn)行性衰退的患者中，BNP/NT-proBNP水平?jīng)]有下降，甚至繼續(xù)升高。（3）評(píng)價(jià)急性心衰的預(yù)后:急性心肌梗死(AMI)是急性HF的主要病因，對(duì)AMI患者的追蹤結(jié)果顯示，BNP/NT-proBNP濃度高于中位值的患者，其心臟病致死的比率相對(duì)低于中位值偏高的患者，這表明心梗后高濃度BNP/NT-proBNP測(cè)定值意味著有大面積心肌壞死，從而導(dǎo)致更加明顯的左心室功能不全。應(yīng)用肌鈣蛋白T通過(guò)檢測(cè)心肌壞死的程度來(lái)進(jìn)行危險(xiǎn)性分級(jí)，而應(yīng)用BNP/NT-proBNP則通過(guò)反應(yīng)心臟功能不全來(lái)分級(jí)，二者結(jié)合將達(dá)到最佳的AMI危險(xiǎn)性評(píng)估的效果。研究發(fā)現(xiàn)，BNP/NT-proBNP濃度能獨(dú)立地識(shí)別不良預(yù)后的心衰患者，是判斷心衰患者預(yù)后和進(jìn)行危險(xiǎn)分級(jí)的有力指標(biāo)。

4.2 BNP與心肌梗死

（1）BNP對(duì)心肌梗塞范圍、梗塞后左心室功能監(jiān)測(cè):血漿BNP水平與AMI的梗死面積呈正相關(guān)，而與左室射血分?jǐn)?shù)、心臟指數(shù)呈負(fù)相關(guān)。急性心肌梗死發(fā)生后，血漿BNP 24 h快速升高，然后趨于穩(wěn)定，4 d內(nèi)血漿BNP濃度與透壁性急性心肌梗死患者左室射血分?jǐn)?shù)密切相關(guān)[3]。(2)BNP對(duì)AMI預(yù)后的評(píng)估:在AMI后測(cè)定BNP，不僅可識(shí)別有無(wú)左心室收縮功能不全，而且在判斷左室重構(gòu)和死亡危險(xiǎn)方面優(yōu)于超聲診斷。新近有資料認(rèn)為，BNP是預(yù)測(cè)急性冠脈綜合癥患者30 d內(nèi)死亡率最好的標(biāo)志物，其他的研究者證明NT-proBNP水平的中值能夠預(yù)言ACS患者4年內(nèi)的死亡率。

5 BNP在法醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用及前景

Bao-Li Zhu等[5]對(duì)法醫(yī)尸檢案263例（男性195例，女性68例，年齡24～94歲）在死后72 h內(nèi)通過(guò)放射免疫法，免疫熒光分析檢測(cè)心包液中ANP、BNP、cTnT濃度。結(jié)果顯示，在死后72 h內(nèi)，ANP、BNP與cTnT濃度測(cè)定值之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在心源性死亡中，心包液BNP濃度與BNP/ANP比值遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于非心源性死亡病例。

Jens Peter Goetze[6]等通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，在缺血2.2±0.2 h，左心室缺血區(qū)心肌BNP mRNA含量高出正常對(duì)照組3.5倍；而在心肌缺血區(qū)和正常心肌區(qū)，通過(guò)放射免疫分析及免疫組化方法均未能檢測(cè)到BNP、proBNP存在；在缺血2 h后，心肌缺血組BNP血濃度升高(P=0.028)，而正常對(duì)照組BNP水仍平處于基礎(chǔ)值(95 %±10.2 %，P=0.62)。考慮在急性缺血時(shí)，合成的BNP快速釋放入血，導(dǎo)致染色缺失。為證實(shí)這個(gè)理論，將缺血心肌放入營(yíng)養(yǎng)液培養(yǎng)3 h，雖未能從細(xì)胞中測(cè)得BNP、proBNP，但在培養(yǎng)液中測(cè)得其存在，因而證實(shí)了左心室肌在缺血時(shí)BNP基因表達(dá)增強(qiáng)，BNP合成增多，且迅速釋放入血。徐永城[7]等結(jié)扎大鼠心臟左前降支，用RT-qPCR法、普通PCR法檢測(cè)在急性心肌缺血后，目的基因BNP的mRNA表達(dá)變化與急性心肌梗死發(fā)生后所經(jīng)歷時(shí)間的關(guān)系。結(jié)果表明BNP基因在急性心肌梗死發(fā)生3 h后在心肌中的表達(dá)量明顯增加，而在1 h組心肌中表達(dá)的量與10 min、30 min組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示BNP基因并非是能反映心肌缺血極早期變化的最佳基因。

總之，BNP在臨床醫(yī)學(xué)中的研究相對(duì)較多，目前血BNP濃度檢測(cè)主要應(yīng)用于心功能、急性冠脈綜合征的診斷、治療與預(yù)后。雖BNP在法醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用國(guó)內(nèi)外報(bào)道不多，但BNP在法醫(yī)病理學(xué)尸體解剖中的死因分析、死亡方式的推斷以明確傷病關(guān)系等方面都將發(fā)揮越來(lái)越重要的作用。隨著研究的深入，其檢測(cè)和診斷標(biāo)準(zhǔn)將更加標(biāo)化和量化，在法醫(yī)中的應(yīng)用也將更加廣泛與深入。

參考文獻(xiàn)

[1] Tremblay J，Desjardins R，Hum D，et al.Biochemistry and physiology of natriuretic peptide receptor guanylyl cyclases [J].Mol Cell Biochem，2002，230(1-2):31-47.

[2] Loke I，Squire IB，Davies JE，et al.Reference ranges for Natriuretic peptide for diagnostic use are dependent on age gender and heart rate[J].Eur J Heart Fail，2003，5(5):599-606.

[3] 陳協(xié)興，洪華山，王一波，等.腦利鈉肽對(duì)急性呼吸困難的鑒別診斷意義[J].中華急診醫(yī)學(xué)雜志，2004，13(4):254-256.

[4] 吳士禮，包宗明，史曉俊，等.急性冠脈綜合征患者血漿腦鈉素檢測(cè)及其意義[J].中國(guó)心血管病研究雜志，2006，4（4）:278-280.

篇11

目前抑郁癥的發(fā)病率有逐步增加的趨勢(shì)，據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）有關(guān)全球疾病總負(fù)擔(dān)的統(tǒng)計(jì)顯示，1990年抑郁癥排在第5位，抑郁癥與自殺加在一起占5.9%，列第2位。預(yù)計(jì)到2020年抑郁癥的疾病負(fù)擔(dān)將上升到第2位，列在冠心病之后[1]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)諸多研究表明其病因跟遺傳、生物化學(xué)、心理、社會(huì)和環(huán)境等多種因素有關(guān)[2]。蒙醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)上雖然沒(méi)有明確記載有關(guān)抑郁癥的資料，但蒙醫(yī)學(xué)作為一門傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)，對(duì)抑郁癥有著獨(dú)特的認(rèn)識(shí)及研究成果。

1 病因

蒙醫(yī)認(rèn)為赫依、希拉、巴達(dá)干是疾病的基本因素[3]。正常的赫依、希拉、巴達(dá)干稱為立身三根，它們共同構(gòu)成人的機(jī)體。它們分布在人體的不同部位，起著各自的作用。赫依、希拉、巴達(dá)干三根為人體之本基，概括為陰、陽(yáng)、氣。因此，三根赫依、希拉、巴達(dá)干功能失調(diào)是抑郁癥的主要病因[4]。三根的功能不僅表現(xiàn)在正常的生理活動(dòng)中，同樣也表現(xiàn)在異常的病理變化中[5]。

正常赫依主要依賴腰胯部，居于人體下半身，性屬中性偏寒。赫依具有輕、粗、動(dòng)、涼、細(xì)、堅(jiān)等六種秉性。正常赫依主呼吸、輸送飲華、物質(zhì)代謝、血液循環(huán)、肢體活動(dòng)、五官感覺(jué)、大小便排泄，并保持希拉和巴達(dá)干相對(duì)平衡，是維持生理活動(dòng)的動(dòng)力。正常赫依遇到飲食、起居、氣候或其他誘發(fā)赫依旺盛的因素可發(fā)生病變，由立體三根之一轉(zhuǎn)變?yōu)槿齻€(gè)基礎(chǔ)病因之一。赫依的正常生理功能紊亂可導(dǎo)致希拉和巴達(dá)干失去相對(duì)平衡。異常赫依影響其竄行之道，即屬于五臟的心、屬于六腑的大腸、屬于七素的骨關(guān)節(jié)、屬于感覺(jué)器官的耳朵和觸覺(jué)部位而出現(xiàn)一系列赫依偏旺的癥狀。比如由于赫依的輕、動(dòng)秉性可出現(xiàn)頭暈、虛嘆、常哈欠、伸腰、干嘔、注意力不集中、偶有意識(shí)不清、游走性刺痛、舉止輕捷、睡眠不安等癥狀，由于粗秉性可引起皮膚粗糙、舌糙發(fā)紅、多在饑餓時(shí)或下午、凌晨發(fā)病等癥狀，由于涼秉性可引起惡寒、戰(zhàn)栗、喜溫暖等癥狀，由于其細(xì)秉性可引起腰胯部及全身骨關(guān)節(jié)、牙齒和指尖麻疼等癥狀，因其堅(jiān)秉性可出現(xiàn)不易腹瀉、耐瀉藥、如有腫塊則不易化膿成熟等癥狀[6]。以上癥狀中頭暈、注意力不集中、睡眠不安、游走性刺痛、干嘔等癥狀與抑郁癥患者的臨床癥狀完全相符。因此可初步推斷出抑郁癥的癥狀可能是赫依發(fā)生病變引起的，即抑郁癥的病因與蒙醫(yī)赫依有關(guān)。

巴達(dá)干性屬寒，主要具有重、寒、膩、鈍、潤(rùn)、固、粘等七種秉性。巴達(dá)干依賴于腦部而居于膈肌以上部位。巴達(dá)干主要有促進(jìn)發(fā)育、使人變得肥壯、堅(jiān)定意志、使關(guān)節(jié)牢固而、使人變得心寬、增加人的耐力、調(diào)節(jié)睡眠、控制希拉的熱能等作用。正常的巴達(dá)干當(dāng)遇到跟它秉性相似的飲食、起居、氣候及其他誘因時(shí)會(huì)變得旺盛、超出正常量，與赫依、希拉兩根相搏，串行到頭、舌、鼻、胃、腎、膀胱、肺、脾、食物之精華、肌肉、脂肪、骨髓、大小便等引起相關(guān)癥狀。比如由于巴達(dá)干的寒秉性引起人體熱能下降、消化不良、口唇發(fā)澀、食欲減退、胃腸脹氣、頻繁打嗝、吐胃內(nèi)容物、腰胯部疼痛、全身發(fā)涼癥狀，由于巴達(dá)干的重秉性引起身心發(fā)沉、治病療效慢、多睡、精神紊亂、思維遲鈍、頭悶、意識(shí)模糊、懶散等癥狀，由于膩秉性可出現(xiàn)脂肪增多、發(fā)胖癥狀，由于鈍秉性可出現(xiàn)病程延長(zhǎng)、病情緩解較慢，由于秉性患者皮膚變得白嫩，由于固的秉性可出現(xiàn)疼痛部位較穩(wěn)定而疼痛時(shí)間長(zhǎng)，由于巴達(dá)干的粘性可出現(xiàn)鼻涕、涎等增多、大便和嘔吐物等成粘樣等癥狀[6]。以上癥狀中消化不良、食欲下降、腰胯部疼痛、身心發(fā)沉、思維遲緩、精神紊亂、意識(shí)模糊、懶散等癥狀與抑郁癥的臨床癥狀基本一致。因此可推斷出抑郁癥的癥狀可能與巴達(dá)干的病變相似，即抑郁癥的病因可能與巴達(dá)干相關(guān)。

綜上所述，抑郁癥的病因與巴達(dá)干和赫依偏旺引起的。赫依和巴達(dá)干相互搏斗導(dǎo)致三根平衡失調(diào)，影響心、腦和白脈系統(tǒng)等引起抑郁癥的一系列癥狀。

2 病機(jī)

抑郁癥的發(fā)病多與心、語(yǔ)、身三大業(yè)過(guò)度或紊亂有關(guān)，如日常生活中過(guò)度行腦力勞動(dòng)、過(guò)度悲傷、過(guò)度懷疑、過(guò)度貪得或過(guò)度自卑等引起體內(nèi)赫依偏旺，與希拉、巴達(dá)干相搏而導(dǎo)致三根平衡失調(diào)，生理功能紊亂[7]。進(jìn)而影響心、腦及白脈等竄行之道。蒙醫(yī)學(xué)認(rèn)為心臟為五臟之王，心臟雖然居于巴達(dá)干區(qū)，它本身是總赫依的所寓之處，普行赫依和完成希拉居于心臟，故赫依發(fā)生病變時(shí)心臟為病變赫依的竄行之道，心臟的功能主要由赫依支配，故赫依發(fā)生病變時(shí)容易紊亂心臟的正常功能。心臟為血液循環(huán)的樞紐，心臟在普行赫依的動(dòng)力下通過(guò)動(dòng)脈把血液和空氣運(yùn)輸?shù)饺梭w各臟器，并把飲食之精華傳送到人體各部位滋養(yǎng)全身各組織器官，此外心主精神、意志、思維等[6]。而正如“四部醫(yī)典”曰：“腦為白脈之海”，由諸多個(gè)白脈形成的白脈之海稱為腦。腦為司命赫依和能足巴達(dá)干所寓之處，又在兩者支配下發(fā)揮掌管人體各系統(tǒng)器官的功能，是生命之根本[8]。蒙醫(yī)學(xué)在診斷治療疾病時(shí)十分重視整體觀，認(rèn)為人和大自然是一個(gè)對(duì)立統(tǒng)一的整體并且人體本身也是這巨大系統(tǒng)的縮影，也是一個(gè)對(duì)立統(tǒng)一的整體[9]。其中各器官和臟腑均有相應(yīng)的部位，并在相互之間有著密切關(guān)系。其中心與腦由黑白脈道相連，腦的滋養(yǎng)血液借普行赫依的作用由心臟供給，而腦借助從腦、脊髓延伸到心臟的隱匿脈支配心臟的正常功能。抑郁癥初期赫依偏旺，且由于它的輕、動(dòng)等秉性上升到巴達(dá)干區(qū)，與巴達(dá)干相搏并侵犯屬于其竄行之道的心臟，赫依的輕、動(dòng)等秉性與巴達(dá)干的重、鈍等秉性相對(duì)立而赫依逐漸偏衰，巴達(dá)干逐漸偏旺。由于赫依的偏衰引起氣血運(yùn)行障礙及感覺(jué)神經(jīng)功能紊亂，合并巴達(dá)干的粘性堵塞心之竅出現(xiàn)身心發(fā)沉、不愿言語(yǔ)、思維遲緩、反應(yīng)遲鈍、全身無(wú)力、懶散等相關(guān)癥狀。

3 治療

抑郁癥為巴達(dá)干、赫依功能紊亂引起的[10-11]。發(fā)病部位在心、腦和白脈系統(tǒng)。故抑郁癥的治療主要以調(diào)節(jié)三根，鎮(zhèn)巴達(dá)干、赫依，寧心、安神，促進(jìn)白脈傳導(dǎo)為原則[12-13]。根據(jù)蒙醫(yī)整體觀與寒熱調(diào)節(jié)理論，選用蒙醫(yī)溫針等溫性的傳統(tǒng)療法及匝迪-5味丸、檳榔十三味丸等溫性藥物已達(dá)到一定療效。劉耀凍等[14]觀察蒙藥匝迪-5味丸和中藥逍遙丸結(jié)合心理療法治療腦卒中后抑郁癥的療效， 20例患者全部治愈，其中1～2月痊愈14例，占70%，2～3月治愈6例，占30%，隨訪均未復(fù)發(fā)。邢薩茹拉等[13]觀察蒙藥檳榔十三味丸治療抑郁癥30例臨床療效，得到檳榔十三味丸治療抑郁癥臨床總有效率為96.7%；治療第一周末、第二周末漢密爾頓量表評(píng)分均較治療前顯著下降；治療1周后，焦/軀體化和睡眠障礙因子分較治療前的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。蘇榮等[15]用蒙醫(yī)溫針治療抑郁癥患者37例，治療后癥狀明顯較治療前好轉(zhuǎn)，治療前后評(píng)分有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。賽音朝克圖等[16]應(yīng)用蒙醫(yī)三根平衡針刺激巴達(dá)、心穴與黑白際穴結(jié)合鹽酸帕西汀治療首發(fā)抑郁癥，結(jié)果為蒙醫(yī)三根平衡針結(jié)合藥物治療抑郁癥起效快、療效好，優(yōu)于單用藥物治療。

4 小結(jié)

分析“中國(guó)精神障礙分類與診斷標(biāo)準(zhǔn)”（CCMD-3）[17]提出的抑郁癥診斷標(biāo)準(zhǔn)和臨床表現(xiàn)，筆者認(rèn)為抑郁癥是由于長(zhǎng)期身、心、語(yǔ)功能亢進(jìn)或不調(diào)導(dǎo)致三根失去自有的生理平衡，尤其赫依與巴達(dá)干相搏侵犯心臟和白脈系統(tǒng)所致，屬蒙醫(yī)心思病或狂癥范疇，其癥狀更接近“心思病”分類中的寒性心思病，而重度抑郁癥的癥狀更接近蒙醫(yī)“狂癥”分類中的“巴達(dá)干狂”。按疾病的本性分類屬寒性疾病。具有癥狀頑固、復(fù)發(fā)率高等特征。目前蒙醫(yī)在寒熱平調(diào)原則及整體觀等基礎(chǔ)理論的指導(dǎo)下，以調(diào)節(jié)三根、抑巴達(dá)干和赫依、寧心、安神、促進(jìn)白脈傳導(dǎo)為原則治療抑郁癥已經(jīng)得到一定療效。但現(xiàn)蒙醫(yī)對(duì)抑郁癥的研究報(bào)告尚少，大多數(shù)是以個(gè)人臨床經(jīng)驗(yàn)等形式報(bào)道，蒙醫(yī)治療抑郁癥的作用機(jī)制等還有待于進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

[1]郝偉，于欣主編.精神病學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2013：108.

[2]何舒，林渝峰，李霞，等.抑郁癥的發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展[J].四川生理科學(xué)雜志，2006，28（3）：126.

[3]達(dá)日茂瑪仁巴?羅布桑朝日嘎，金光注釋集[M].呼和浩特：內(nèi)蒙古人民出版社，1998：338-339.

[4]蘇榮扎布，蒙醫(yī)臨床學(xué) [M].呼和浩特：內(nèi)蒙古人民出版社；1999：623.

[5]白青云，中國(guó)醫(yī)學(xué)百科全書-蒙醫(yī)學(xué)[M]，上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1992：5.

[6]巴吉格木德主編.蒙醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)理論[M].呼和浩特：內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院印刷廠，2008：159-160，169-170，119.

[7]包伍葉，佟海英，包哈申，等.蒙醫(yī)學(xué)對(duì)抑郁癥的認(rèn)識(shí)與治療進(jìn)展[J].中國(guó)民族醫(yī)藥雜志，2012，5（5）：68-69.

[8]阿古拉主編.蒙醫(yī)傳統(tǒng)療法[M].呼和浩特：內(nèi)蒙古教育出版社，2012：40.

[9]策?蘇榮扎布主編.蒙醫(yī)內(nèi)科學(xué)[M] .北京：民族印刷廠，1989：10.

[10]呼日樂(lè)巴根，佟海英，蓮花，等.匝迪-5味丸對(duì)急性應(yīng)激所致行為絕望小鼠的抗抑郁作用研究[J].中國(guó)中醫(yī)急癥雜志，2015，1.25（1）：56-58.

[11]呼日樂(lè)巴根，佟海英，松林，等.肉寇-5味丸對(duì)慢性抑郁模型大鼠行為及海瑪單胺遞質(zhì)的影響[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2015，6.21（11）：146-149.

[12]色哈斯巴根，張淑蘭.灸法結(jié)合蒙藥治療抑郁性精神病19例[J].中國(guó)民族醫(yī)藥雜志，1996，3：22.

[13]邢薩茹拉，佟海英，趙福全，等.蒙藥檳郎十三味丸治療抑郁癥30例臨床療效的初步觀察[J].中國(guó)民族民間醫(yī)藥，2011，12：10.

[14]劉耀凍，郭春麗，孫麗萍，等.蒙藥匝迪-5味丸、逍遙丸聯(lián)合心理療法治療腦卒中后后抑郁癥[J].中國(guó)民族醫(yī)藥雜志，2007（9）：10-11.

[15]蘇榮，蒙醫(yī)溫針治療抑郁癥[J].中國(guó)蒙醫(yī)藥雜志，2009，1（15）：69.

篇12

論文題目：中文標(biāo)題用三號(hào)宋體加粗，應(yīng)簡(jiǎn)明確切地反映文章的主題，一般不超過(guò)25個(gè)漢字。有基金項(xiàng)目資助的請(qǐng)?jiān)跇?biāo)題后用"*"號(hào)右上標(biāo)表示。英文標(biāo)題用三號(hào)TimesNewRoman加粗，要與中文標(biāo)題含義一致，并符合英文書寫習(xí)慣。

篇13

1.1 踝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷的常規(guī)診斷學(xué)方法

踝關(guān)節(jié)是人體器官的重要組成部分，為維持下肢功能的主要器官。但是由于外傷的作用，其容易發(fā)生踝關(guān)節(jié)扭傷與骨折，從而造成一系列的后果，嚴(yán)重的可導(dǎo)致參加，其中外側(cè)軟骨的損傷在嚴(yán)重的踝關(guān)節(jié)軟組織損傷中最為常見(jiàn)[1]。目前臨床上對(duì)踝關(guān)節(jié)扭傷所致的軟骨損傷的診斷主要依賴于臨床癥狀進(jìn)行分析，或通過(guò)普通X線、CT檢查推測(cè)軟骨損傷程度，但是不能及時(shí)正確地反應(yīng)踝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷所導(dǎo)致軟骨損傷的真實(shí)情況，導(dǎo)致診斷效果不好[2]。

1.2 踝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷的磁共振成像（MRI）診斷學(xué)方法

MRI具有任意斷面成像、多方位成像、組織分辨率高等優(yōu)點(diǎn)。而踝關(guān)節(jié)因其變化多端的功能運(yùn)作和錯(cuò)綜復(fù)雜的解剖結(jié)構(gòu)而越來(lái)越受到人們的關(guān)注，有不少學(xué)者在這方面已作了較多的研究并在1.0T或1.5T MRI機(jī)上制訂了一系列掃描常規(guī)并指出常規(guī)足、踝關(guān)節(jié)檢查中，患者一般采取仰臥位，腳取自然中立位，跖屈或背屈位后置于肢體或頭線圈中；軸位、冠狀位及矢狀位為常規(guī)的MRI掃描位置，軸位及冠狀位對(duì)顯示軟骨的解剖及其病變具有優(yōu)勢(shì)[3-5]。其中矢狀位則主要對(duì)顯示跟腱的病變有很好的診斷效果，而冠狀位能較好地顯示軟骨損傷的病變，同時(shí)臨床上需要根據(jù)不同的要求選擇斜位來(lái)顯示特殊的解剖結(jié)構(gòu)及病變。踝關(guān)節(jié)軟骨損傷后在MRI上主要表現(xiàn)為軟骨增厚、邊緣毛糙、骨周圍脂肪間隙模糊不清、內(nèi)部信號(hào)不均勻及關(guān)節(jié)腔積液等征象[6]。當(dāng)前踝關(guān)節(jié)常規(guī)的掃描序列包括T1WI、T2WI/SE、PDWI、3D-FS-SPGR等序列。其中PDWI、T1WI能較好地顯示正?；虍惓５慕馄式Y(jié)構(gòu)，而T2WI/SE＼3D-FS-SPGR序列則能判斷因外傷、炎癥或浸潤(rùn)所致的損傷情況，從而有利于診斷[7]。

2 隱匿性及細(xì)微骨折的醫(yī)學(xué)影像診斷學(xué)應(yīng)用分析

2.1 隱匿性及細(xì)微骨折的常規(guī)診斷學(xué)方法

細(xì)微骨折一般是患者骨折斷段不明顯，骨折斷裂處不徹底，造成患者臨床骨折特異性體征不顯著，普通的X線攝片技術(shù)和CT檢查不易發(fā)現(xiàn)[8]。此外，腹腔周圍骨折存在時(shí)，骨折線不清晰時(shí)，容易被完整骨骼或腹腔內(nèi)臟器等遮擋，不易發(fā)現(xiàn)骨折處，因此，導(dǎo)致臨床出現(xiàn)較多的失治和誤治的現(xiàn)象[9]。隱匿性骨折是指經(jīng)過(guò)傳統(tǒng)X線、CR等計(jì)算機(jī)技術(shù)檢查未見(jiàn)陽(yáng)性骨折征象，但是患者確實(shí)存在骨折[10]。在診斷中，傳統(tǒng)方法為X線，但是存在診斷陽(yáng)性率不高等問(wèn)題。

2.2 隱匿性及細(xì)微骨折的多層螺旋CT（MSCT）與MRI診斷學(xué)方法

MSCT技術(shù)填補(bǔ)傳統(tǒng)X線攝片測(cè)量平面及的缺陷，其對(duì)髖關(guān)節(jié)以及踝關(guān)節(jié)的等處顯示較清晰，相比較而言，鼻骨等骨骼覆蓋較廣、結(jié)構(gòu)較復(fù)雜的骨折面，MSCT對(duì)于捕捉此類骨折線走形多樣、透亮度不高的骨折平面，顯示較為局限，陽(yáng)性診斷率不高[11]。近年來(lái)，MRI技術(shù)的引進(jìn)，大大提高隱匿性骨折臨床確診率。尤其是對(duì)于四肢關(guān)節(jié)等處的復(fù)雜骨折類型，以及合并關(guān)節(jié)積液及水腫較重的骨折患者價(jià)值更高[12]。MRI在骨挫傷中檢出率高，不同掃描參數(shù)可對(duì)比得出骨折數(shù)據(jù)，尤其適用于隱匿性骨折患者，對(duì)于合并血腫、脂肪覆蓋等骨折情況復(fù)雜的部位，MRI檢出率高于MSCT[13]。臨床若經(jīng)傳統(tǒng)X線未見(jiàn)骨折顯影患者，但臨床癥狀及體征直指骨折，都應(yīng)該及時(shí)采用MSCT或MRI檢查，對(duì)于骨折部位特殊、情況嚴(yán)重的患者，可以聯(lián)合兩種檢測(cè)，為臨床診治及事故鑒定提供更加充分的臨床數(shù)據(jù)[14]。

3 頜骨腫瘤的醫(yī)學(xué)影像診斷學(xué)應(yīng)用分析

頜骨是面骨中最重要的骨性器官之一，頜骨的發(fā)育與咀嚼、語(yǔ)言、吞咽和呼吸等功能有關(guān)。頜骨腫瘤可原發(fā)于上下頜骨，也可以由頜骨或頜骨鄰近的組織結(jié)構(gòu)或者自身的附著組織所累及。當(dāng)前我國(guó)頜骨腫瘤的發(fā)病率雖然不高，但是對(duì)于患者的身心都有一定的影響[15]。從發(fā)病上分析，頜骨腫瘤既有遺傳因素的影響，也可能受周圍環(huán)境因素干擾，多數(shù)為良性腫瘤[16-17]。一般來(lái)說(shuō)，頜骨的解剖結(jié)構(gòu)復(fù)雜，鄰近解剖間隙較多，為此頜骨腫瘤常侵犯顱底、翼腭窩、鼻腔、眼眶等重要部位，為此對(duì)于治療的要求很高[18]。頜骨腫瘤的治療中既要根治性切除病變，又要關(guān)注患者術(shù)后的面容、外觀與相關(guān)功能的要求。為此在手術(shù)治療前了解頜骨病變的范圍、病變毗鄰關(guān)系及其相關(guān)性質(zhì)非常重要，而影像學(xué)檢查是其主要手段[19]。CT掃描操作簡(jiǎn)便，具有良好的定位能力及更高的分辨率，特別適于頜骨的檢查[6]。而多層螺旋CT是用X線束對(duì)人體的某一部分按一定厚度的層面進(jìn)行掃描，圖像質(zhì)量好，成像速度快，診斷能力更強(qiáng)，可由計(jì)算機(jī)進(jìn)行處理后輸出圖像信息，可為制訂術(shù)前手術(shù)方案、術(shù)后評(píng)估提供可靠的依據(jù)[20]。而在CT重建中，其主要技術(shù)包括容積重建（volume rendering，VR）和多平面重建（multi planner reconstruction，MPR）。MPR可任意方向成像，能全面顯示腫瘤內(nèi)部結(jié)構(gòu)，從而準(zhǔn)確判斷病理影像學(xué)特征判斷，也是鑒別不同腫瘤的重要依據(jù)。而VR獲得的是真實(shí)的三維顯示圖像，層次清晰，可清楚顯示血管圖像。但VR重建對(duì)頜骨腫瘤的顯示容易造成假像，因而必須結(jié)合MPR圖像進(jìn)行判斷[21]。

4 脊柱骨折的醫(yī)學(xué)影像診斷學(xué)應(yīng)用分析

脊柱骨折是臨床上的常見(jiàn)骨折類型，可由外傷也可由病理疾病引起。其中骨質(zhì)疏松性脊柱骨折多發(fā)生于腰椎、胸椎，大部分患者并無(wú)神經(jīng)受損癥狀體征，日常生活中稍有不慎或輕微創(chuàng)傷就有可能導(dǎo)致骨質(zhì)[1]。調(diào)查顯示，我國(guó)老年人口中有400萬(wàn)人因骨質(zhì)疏松而致壓縮性骨折，許多人的生活質(zhì)量因此受到嚴(yán)重影響，甚至致殘和死亡[22-23]。