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及時(shí)章 分子生物學(xué)技術(shù)概述 一、引言 二、目的基因的獲取 三、克隆載體的構(gòu)建和選擇 四、載體的轉(zhuǎn)化 五、重組子的篩選 六、基因表達(dá) 七、生物工程技術(shù)的應(yīng)用 參考文獻(xiàn)第二章 核酸提取技術(shù) 及時(shí)節(jié) 質(zhì)粒DNA的提取 一、引言 二、堿裂解法小量質(zhì)粒提取所需的儀器、材料及基本步驟 三、Promega質(zhì)粒DNA小量提取試劑盒操作程序 四、注意事項(xiàng) 五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明 六、疑難解析 第二節(jié) 基因組DNA的提取 一、引言 二、從植物組織提取基因組DNA 三、從動(dòng)物組織提取基因組DNA 四、細(xì)菌基因組DNA的制備 五、用DNA提取試劑盒從全血和組織中提取基因組DNA 六、注意事項(xiàng) 七、實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明 八、疑難解析 第三節(jié) RNA的提取 一、引言 二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路和基本步驟 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明 四、疑難解析 參考文獻(xiàn)第三章 目的基因的獲取及鑒定技術(shù) 及時(shí)節(jié) 普通PCR 一、普通PCR的基本概念和原理 二、普通PCR技術(shù)的實(shí)驗(yàn)方法 三、疑難解析 第二節(jié) 實(shí)時(shí)熒光定量PCR 一、實(shí)時(shí)熒光定量PCR的基本概念和原理 二、實(shí)時(shí)熒光定量PCR的定量方法 三、熒光定量PCR的實(shí)驗(yàn)方法 四、熒光定量PCR技術(shù)的應(yīng)用 五、疑難解析 第三節(jié) 環(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增法快速檢測(cè)病原菌 一、引言 二、環(huán)介導(dǎo)恒溫核酸擴(kuò)增的原理 三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路和基本步驟 四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果 五、疑難解析 六、小結(jié) 參考文獻(xiàn)第四章 載體的構(gòu)建和鑒定 及時(shí)節(jié) 克隆載體 一、pBR322載體 二、pUC8——一種Lac選擇型質(zhì)粒 三、pGEM3Z——克隆DNA的體外轉(zhuǎn)錄 四、柯斯質(zhì)粒載體 第二節(jié) 表達(dá)載體 一、原核表達(dá)載體 二、真核表達(dá)載體 第三節(jié) 載體構(gòu)建中的關(guān)鍵工具和步驟 一、關(guān)鍵工具 二、關(guān)鍵步驟 第四節(jié) 載體構(gòu)建的應(yīng)用舉例 一、實(shí)驗(yàn)材料 二、實(shí)驗(yàn)方法 參考文獻(xiàn)第五章 細(xì)菌轉(zhuǎn)化與細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù) 及時(shí)節(jié) 細(xì)菌轉(zhuǎn)化 一、基本原理 二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路和基本步驟 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析 四、疑難解析 第二節(jié) 細(xì)胞轉(zhuǎn)染 一、基本原理 二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和基本步驟 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析 四、疑難解析 參考文獻(xiàn)第六章 外源基因表達(dá)的鑒定第七章 報(bào)告基因分析第八章 差異基因表達(dá)譜分析第九章 蛋白質(zhì)核酸相互作用技術(shù)第十章 蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用技術(shù)第十一章 微生物體內(nèi)同源重組技術(shù)第十二章 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物技術(shù)第十三章 基因打靶技術(shù)第十四章 流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)方法第十五章 干細(xì)胞的分離培養(yǎng)與誘導(dǎo)分化第十六章 小RNA的構(gòu)造及實(shí)驗(yàn)技術(shù)第十七章 非編碼RNA數(shù)據(jù)庫(kù)及在線分析工具介紹 及時(shí)章 分子生物學(xué)技術(shù)概述 一、引言 二、目的基因的獲取 三、克隆載體的構(gòu)建和選擇 四、載體的轉(zhuǎn)化 五、重組子的篩選 六、基因表達(dá) 七、生物工程技術(shù)的應(yīng)用 參考文獻(xiàn) 第二章 核酸提取技術(shù) 及時(shí)節(jié) 質(zhì)粒DNA的提取 一、引言 二、堿裂解法小量質(zhì)粒提取所需的儀器、材料及基本步驟 三、Promega質(zhì)粒DNA小量提取試劑盒操作程序 四、注意事項(xiàng) 五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明 六、疑難解析 第二節(jié) 基因組DNA的提取 一、引言 二、從植物組織提取基因組DNA 三、從動(dòng)物組織提取基因組DNA 四、細(xì)菌基因組DNA的制備 五、用DNA提取試劑盒從全血和組織中提取基因組DNA 六、注意事項(xiàng) 七、實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明 八、疑難解析 第三節(jié) RNA的提取 一、引言 二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路和基本步驟 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明 四、疑難解析 參考文獻(xiàn) 第三章 目的基因的獲取及鑒定技術(shù) 及時(shí)節(jié) 普通PCR 一、普通PCR的基本概念和原理 二、普通PCR技術(shù)的實(shí)驗(yàn)方法 三、疑難解析 第二節(jié) 實(shí)時(shí)熒光定量PCR 一、實(shí)時(shí)熒光定量PCR的基本概念和原理 二、實(shí)時(shí)熒光定量PCR的定量方法 三、熒光定量PCR的實(shí)驗(yàn)方法 四、熒光定量PCR技術(shù)的應(yīng)用 五、疑難解析 第三節(jié) 環(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增法快速檢測(cè)病原菌 一、引言 二、環(huán)介導(dǎo)恒溫核酸擴(kuò)增的原理 三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路和基本步驟 四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果 五、疑難解析 六、小結(jié) 參考文獻(xiàn) 第四章 載體的構(gòu)建和鑒定 及時(shí)節(jié) 克隆載體 一、pBR322載體 二、pUC8——一種Lac選擇型質(zhì)粒 三、pGEM3Z——克隆DNA的體外轉(zhuǎn)錄 四、柯斯質(zhì)粒載體 第二節(jié) 表達(dá)載體 一、原核表達(dá)載體 二、真核表達(dá)載體 第三節(jié) 載體構(gòu)建中的關(guān)鍵工具和步驟 一、關(guān)鍵工具 二、關(guān)鍵步驟 第四節(jié) 載體構(gòu)建的應(yīng)用舉例 一、實(shí)驗(yàn)材料 二、實(shí)驗(yàn)方法 參考文獻(xiàn) 第五章 細(xì)菌轉(zhuǎn)化與細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù) 及時(shí)節(jié) 細(xì)菌轉(zhuǎn)化 一、基本原理 二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路和基本步驟 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析 四、疑難解析 第二節(jié) 細(xì)胞轉(zhuǎn)染 一、基本原理 二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和基本步驟 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析 四、疑難解析 參考文獻(xiàn) 第六章 外源基因表達(dá)的鑒定 第七章 報(bào)告基因分析 第八章 差異基因表達(dá)譜分析 第九章 蛋白質(zhì)核酸相互作用技術(shù) 第十章 蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用技術(shù) 第十一章 微生物體內(nèi)同源重組技術(shù) 第十二章 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物技術(shù) 第十三章 基因打靶技術(shù) 第十四章 流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)方法 第十五章 干細(xì)胞的分離培養(yǎng)與誘導(dǎo)分化 第十六章 小RNA的構(gòu)造及實(shí)驗(yàn)技術(shù) 第十七章 非編碼RNA數(shù)據(jù)庫(kù)及在線分析工具介紹